無需預(yù)孵育！導入細胞質(zhì)的蛋白轉(zhuǎn)染試劑
- 公司名稱 富士膠片和光（廣州）貿(mào)易有限公司
- 品牌 Wako/和光純藥
- 型號
- 產(chǎn)地
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時間 2020/9/10 14:35:00
- 訪問次數(shù) 1026
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富士膠片和光（廣州）貿(mào)易有限公司是日本富士膠片和光純藥株式會社（FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation）在中國的子公司，主營富士膠片和光品牌試劑產(chǎn)品，供應(yīng)產(chǎn)品超50,000種，囊括了生命科學、藥品生產(chǎn)、品質(zhì)管理領(lǐng)域、合成與材料、分析各個領(lǐng)域。
基于“想要為科研人員提供幫助”的創(chuàng)業(yè)初衷，富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）作為一家滿足前沿研究領(lǐng)域需求的綜合試劑制造商，一直致力于生產(chǎn)和開發(fā)高品質(zhì)的產(chǎn)品，并于2022年6月迎來了創(chuàng)業(yè)100周年。通過發(fā)揮企業(yè)優(yōu)勢“技術(shù)力”，以及三大核心業(yè)務(wù)的試劑業(yè)務(wù)、化成品業(yè)務(wù)和臨床診斷業(yè)務(wù)來滿足學術(shù)界、企業(yè)以及醫(yī)療相關(guān)企業(yè)的廣泛需求。
憑借100 年的歷史經(jīng)驗，富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）在日本市場占據(jù)高份額，作為全球性的試劑供應(yīng)商，以“成就科學未來之力，創(chuàng)造幸福源泉”為愿景，致力于高品質(zhì)試劑的生產(chǎn)與開發(fā)。通過提供試劑，為再生醫(yī)療、癌癥、精神/神經(jīng)疾病和抗體藥物等各類基礎(chǔ)研究和前沿研究做貢獻，并獲得 ISO9001等多項國際認證?；诳煽康募夹g(shù)和品質(zhì)、以及科研人員之間的信賴，作為富士膠片集團的一員將不斷實現(xiàn)全球化發(fā)展。
主要業(yè)務(wù)——試劑
作為富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）試劑業(yè)務(wù)的中國子公司，富士膠片和光（廣州）貿(mào)易有限公司可提供各個領(lǐng)域測試和研究用途的生命科學試劑和化學試劑。
試劑業(yè)務(wù) | ||||||
可廣泛提供生命科學和化學領(lǐng)域的測試研究用產(chǎn)品 | ||||||
生命科學領(lǐng)域 | 化學領(lǐng)域 | |||||
● 培養(yǎng)基生產(chǎn) ● 抗體制備 ● 定制服務(wù) |
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● 認證標準品 ● 有機化學 |
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作為優(yōu)質(zhì)的試劑企業(yè)，我們可以提供滿足不同客戶需求的高品質(zhì)產(chǎn)品。試劑業(yè)務(wù)自創(chuàng)業(yè)以來，已持續(xù)不斷地提供了廣泛領(lǐng)域的試劑產(chǎn)品，并致力于成為滿足前沿技術(shù)領(lǐng)域各項研究需求的試劑制造商。今后也將以過往技術(shù)經(jīng)驗為基石，發(fā)揮作為可信賴的研究支持合作伙伴的作用。
產(chǎn)品一覽
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● 常規(guī)試劑 ● 有機合成試劑 ● 環(huán)境分析試劑 ● 精密分析試劑 ● 色譜試劑 | ● 生化學用試劑 ● 基因研究用試劑 ● 免疫研究用試劑 ● 病理研究用試劑 ● 細胞培養(yǎng)用試劑 | ● 內(nèi)毒素檢測用試劑 ● 生物藥生產(chǎn)用培養(yǎng)基 ● 研究用基礎(chǔ)培養(yǎng)基 ● 定制服務(wù) ● 設(shè)備和耗材 |
豐富的產(chǎn)品類目以及快速供應(yīng)體系
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 | 致力于持續(xù)監(jiān)測市場的需求并跟蹤世界的研究動向。為了能夠及時準確地響應(yīng)客戶的需求，富士膠片和光建立了以自有品牌為中心的豐富產(chǎn)品體系，為各界的研究和開發(fā)領(lǐng)域提供細致的服務(wù)與支持 。 |
高品質(zhì)的試劑提供和生產(chǎn)體系
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 | 試劑生產(chǎn)工廠以東京工廠和大阪工廠為中心，發(fā)揮優(yōu)質(zhì)技術(shù)力量建立的高品質(zhì)生產(chǎn)體系。愛知工廠配備齊全的培養(yǎng)基生產(chǎn)設(shè)備，可用于生產(chǎn)再生醫(yī)療和生物制藥生產(chǎn)用的培養(yǎng)基。 |
優(yōu)質(zhì)的客戶服務(wù)和產(chǎn)品信息
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 | 通過定期更新的主頁網(wǎng)站、富士膠片和光生物微信公眾號、富士膠片和光化學分析微信公眾號，以及不定期的富士膠片和光生物視頻號、網(wǎng)絡(luò)研討會和線下展會，致力于為客戶提供優(yōu)質(zhì)的服務(wù)以及不斷更新的產(chǎn)品信息。 |
強化全球化事業(yè)的開展
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 | 建立日本海外銷售體系，通過提供富士膠片和光純藥（FUJIFILM Wako）優(yōu)質(zhì)研發(fā)力量生產(chǎn)的高品質(zhì)產(chǎn)品，積極推進全球化業(yè)務(wù)。 |
企業(yè)歷史沿革
年份 | 內(nèi)容 |
1922年6月 | 從武田長兵衞商店（現(xiàn)武田薬品工業(yè)株式會社）的化學藥品部門獨立出來，成立了武田化學薬品 株式會社 |
1940年 | 大阪工廠竣工 |
1944年 | 東京工廠竣工 |
1947年 | 更名為和光純薬工業(yè)株式會社 |
1950年 | 展開化成品業(yè)務(wù) |
1952年 | 總部遷移至大阪 |
1960年 | 展開臨床檢測藥業(yè)務(wù) |
1968年 | 播磨工廠竣工 |
1972年 | 公司總部竣工 |
1974年 | 成立德國和光純薬有限會社（今?FUJIFILM Wako Chemicals Europe GmbH） |
1981年 | 成立美國和光純薬株式會社（今?FUJIFILM Wako Chemicals U.S.A Corporation） |
1989年 | 建設(shè)東部配送中心 |
1991年 | 建設(shè)西部配送中心 |
2004年 | 愛知工廠竣工 |
2012年 | 成立和光純耀（上海）化學有限公司（今?富士膠片和光純藥（上海）化學有限公司） |
2015年 | 收購株式會社シバヤギ（今?群馬辦事處） |
2017年 | 成為FUJIFILM Corporation的全資子公司 |
2018年 | 更名為富士膠片和光純藥株式會社 |
2019年 | 合并IS Japan Co.,Ltd.（今?戶田辦事處） |
2022年 | 成立100周年 |
生物化學試劑、儀器和耗材
| 供貨周期 | 一個月以上 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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無需預(yù)孵育！導入細胞質(zhì)的蛋白轉(zhuǎn)染試劑
ProteoCarry ＜Protein Transfection Reagent＞
本產(chǎn)品是將蛋白以及葡聚糖等生物大分子導入細胞內(nèi)，尤其是導入細胞質(zhì)的試劑。傳統(tǒng)的蛋白轉(zhuǎn)染試劑存在蛋白滯留在內(nèi)體或溶酶體中的問題，但是由于本產(chǎn)品可以高效地將蛋白運送至細胞質(zhì)，可以廣泛地適用于在評價導入蛋白的細胞內(nèi)功能和抗體導入引起的功能抑制誘導等的實驗。另外與傳統(tǒng)產(chǎn)品不同的是，本品無需與蛋白進行預(yù)孵育，所以不會形成復(fù)合體，低限度地限制其對蛋白功能的影響。
※本產(chǎn)品僅供研究，研究以外請勿使用。
◆蛋白轉(zhuǎn)染試劑及其問題
蛋白轉(zhuǎn)染試劑（Proteofection試劑）是將重組蛋白和抗體直接導入細胞的工具。與將質(zhì)粒導入以誘導表達目的蛋白的方法相比，可以更迅速地導入目的蛋白，因而受到了廣泛地關(guān)注。
雖然已經(jīng)開發(fā)了許多基于肽、陽離子的脂質(zhì)或聚合物的蛋白轉(zhuǎn)染試劑，但它們都是與蛋白形成復(fù)合物后，通過胞吞作用攝入細胞內(nèi)，破壞內(nèi)體膜將其運送至細胞質(zhì)。然而，現(xiàn)有的大部分試劑內(nèi)體膜的破壞活性低，并且從內(nèi)體逃脫不足，導入的蛋白大部分都轉(zhuǎn)移至溶酶體降解系統(tǒng)。本產(chǎn)品是一種新型肽蛋白轉(zhuǎn)染試劑，克服了傳統(tǒng)的蛋白轉(zhuǎn)染試劑的缺點，通過強有力的內(nèi)體膜選擇性破壞活性，高效地向細胞質(zhì)運送蛋白，使轉(zhuǎn)導的蛋白在細胞內(nèi)發(fā)揮活性。另外，與傳統(tǒng)的蛋白轉(zhuǎn)染試劑不同，本品無需與蛋白的復(fù)合物，不僅僅是蛋白，還可以向細胞質(zhì)導入生物大分子（葡聚糖等）。
圖1. 細胞導入原理的比較
圖2是導入熒光標記IgG的案例。不添加轉(zhuǎn)染試劑時，以內(nèi)體/溶酶體的染色為主，從細胞質(zhì)中無法獲得熒光信號，與之相對的，可以觀察到在本產(chǎn)品案例中，內(nèi)體、細胞質(zhì)被大面積染色。（詳情請參照應(yīng)用實例）
圖2. 向HeLa細胞導入熒光標記IgG的比較
◆特點
● 基于肽特性的蛋白轉(zhuǎn)染試劑，顯示出高度水溶性。
● 優(yōu)異的內(nèi)體膜破壞活性，與傳統(tǒng)方法相比顯示出高細胞質(zhì)傳達性。
● 無需與導入物質(zhì)進行預(yù)孵育，可以簡便且迅速地轉(zhuǎn)染。
● 由于不會與蛋白形成復(fù)合物，所以需要添加濃度較高的蛋白，但是可以低限度地抑制對蛋白功能的影響。
● 只需要1小時的處理就可以充分地轉(zhuǎn)染至細胞質(zhì)。
● 有無血清（<10% FBS）不會影響導入效率，可以根據(jù)想要使用的細胞設(shè)計實驗。
● 已有向細胞質(zhì)導入各種蛋白及生物大分子的應(yīng)用實例。
● 例：IgG抗體、功能性蛋白（Cre recombinase, Saponin）、多糖（葡聚糖）
● 推薦使用濃度幾乎沒有細胞毒性。
◆使用方法概述
1. 向新鮮的培養(yǎng)基（無血清培養(yǎng)基，10%以下含F(xiàn)BS培養(yǎng)基或PBS）添加本產(chǎn)品以及想要導入的蛋白。
1. （配制轉(zhuǎn)染混合液）。
1. ※無需預(yù)孵育
2. 用PBS清洗2次細胞（80%以下的融合狀態(tài)）后，向細胞添加轉(zhuǎn)染混合液。
3. 在轉(zhuǎn)染混合液中培養(yǎng)細胞（~1h）
4. 用PBS清洗2次細胞后，添加新鮮的培養(yǎng)基。
5. 實現(xiàn)各項應(yīng)用。
◆試劑盒組成
● ProteoCarry（4 mg）
● FITC-dextran（2 mg，陽性對照用）
實驗次數(shù)的預(yù)測
孔板的尺寸 | ProteoCarry | FITC-dextran |
6 well | 14 assays | 5 assays |
12 well | 28 assays | 10 assays |
24 well | 56 assays | 20 assays |
48 well | 140 assays | 50 assays |
96 well | 280 assays | 100 assays |
◆有導入數(shù)據(jù)的細胞
HeLa, SW280, COS7, NIH3T3, HUVEC
參考導入量
導入物 | 推薦培養(yǎng)基的終濃度 | |
抗體 | 50～250 μg/mL | |
蛋白 | Saponin | 1～10 μg/mL |
Cre recombinase | 10～100 μg/mL | |
FITC-dextran | 200 μg/mL | |
※導入效率根據(jù)細胞類型，細胞數(shù)量和蛋白類型各種因素改變。以上數(shù)據(jù)僅供參考，建議每次實驗都要優(yōu)化數(shù)據(jù)。
◆應(yīng)用實例
1. 向細胞內(nèi)導入FITC-dextran
向HeLa細胞導入FITC-Dextran（培養(yǎng)基的終濃度為200 μg/mL），僅向細胞添加FITC-Dextran時，（Reagent(-)）觀察到點狀的熒光信號，細胞質(zhì)中幾乎沒有觀察到信號；相反，使用本產(chǎn)品時擴散到了整個細胞質(zhì)。
實驗概要：
向HeLa細胞（80% confluent）添加200 μg/mL FITC-dextran, 1×ProteoCarry in α-MEM，并培養(yǎng)1個小時。用PBS清洗細胞后，進行核染色（Hoechst）。
2. 向細胞內(nèi)導入熒光標記IgG
向HeLa細胞導入熒光標記IgG抗體（培養(yǎng)基終濃度為250 μg/mL），僅有抗體添加至細胞時，可以觀察到胞吞作用自發(fā)性攝入點狀的熒光信號，表明抗體停留在內(nèi)體和溶酶體中。另一方面，使用本產(chǎn)品時，不僅能觀察到點狀的內(nèi)體結(jié)構(gòu)，還可以觀察到它主要在細胞質(zhì)中廣泛擴散。
※用熒光信號觀察細胞擴散時，與內(nèi)體相比，由于細胞質(zhì)的體積較大，信號會被稀釋。細胞質(zhì)信號的檢測需要添加高濃度的熒光標記蛋白，在本數(shù)據(jù)中添加了250 μg/mL的熒光標記IgG。
實驗概要：
向HeLa細胞（80% confluent）添加250 μg/mL熒光標記IgG，1×ProteoCarry in α-MEM并培養(yǎng)1小時。用PBS清洗細胞后，進行核染色（Hoechst）。
3. 向細胞內(nèi)導入Cre recombinase
將設(shè)計為Cre recombinase不存在時表達DsRed，只有在Cre recombinase存在時發(fā)生重組表達GFP的質(zhì)粒向HeLa細胞導入基因。相對于導入第二天就表達DsRed的HeLa細胞，使用本產(chǎn)品導入Cre recombinase（培養(yǎng)基終濃度為10 μM），依賴導入細胞內(nèi)的Cre recombinase表達GFP，本產(chǎn)品在維持Cre recombinase的功能下將其導入了細胞。
實驗概要：
向HeLa細胞轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的第二天，向HeLa細胞添加10 μM Cre recombinase, 1×ProteoCarry in α-MEM，并培養(yǎng)1小時。用PBS清洗細胞后，用新的培養(yǎng)基再培養(yǎng)24小時。
◆保存
● 運輸：室溫
● 保存：-20℃
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
| FDV-0015 | ProteoCarry<Protein Transfection Reagent> ProteoCarry <蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染試劑> | 1 set |
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