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微生物計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查的一般要求與操作方法!

來源:北京百歐博偉生物技術(shù)有限公司   2025年05月29日 16:33  

計數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查

 

1一般要求

 

2、胰酪大豆胨瓊脂(TSA)

 

無菌性檢查:取已滅菌TSA注皿,于30-35℃培養(yǎng)3天,應(yīng)無菌落生長。

 

試驗用菌種:金葡、銅綠、枯草、白念、黑曲

 

接種方法:

 

涂布法:分別接種不大于100cfu試驗用菌懸液于TSA平板表面;

 

傾注法:分別接種不大于100cfu試驗用菌懸液于無菌平皿中,傾注約15ml該培養(yǎng)基,輕輕搖勻。

 

適用性檢查:枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌30-35℃培養(yǎng)不超過3天;白色念珠菌、黑曲霉于30-35℃培養(yǎng)不超過5天。

 

判斷標(biāo)準(zhǔn):與對照培養(yǎng)基比較,菌落平均數(shù)比值在0.5-2(50%-200%)范圍內(nèi),且菌落形態(tài)大小一致。

 

3、胰酪大豆胨液體(TSB)

 

無菌性檢查:取已滅菌的TSB,于30-35℃培養(yǎng)不少于3天,培養(yǎng)基應(yīng)澄清。

 

試驗用菌種:金葡、銅綠、枯草

 

接種方法:

 

涂布法:分別接種試驗用菌懸液于該培養(yǎng)基中,接種量不大于100cfu,搖勻,培養(yǎng)。

 

適用性檢查:30-35℃培養(yǎng)不超過3天。

 

判斷標(biāo)準(zhǔn):金葡、銅綠、枯草接種后,與對照培養(yǎng)基比較,試驗菌生長良好。

 

備注:該培養(yǎng)基同時用于稀釋液的制備和控制菌檢查時,需考慮同時滿足計數(shù)和控制菌檢查培養(yǎng)基適用性檢查控制要求。

 

4、沙氏葡萄糖瓊脂(SDA)

 

無菌性檢查:取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應(yīng)無菌落生長。

 

試驗用菌種:白色念珠菌、黑曲霉

 

接種方法:

 

涂布法分別接種不大于100cfu允試驗用菌懸液于該平板表面

 

傾注法接種大于1cfu試驗用菌懸液于無菌平皿中,傾注約15ml該培養(yǎng)基,輕輕搖勻。

 

適用性檢查:白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天

 

判斷標(biāo)準(zhǔn):與對照培養(yǎng)基比較菌落平均數(shù)比值在0.5-2(50%一200%)范圍且菌落大小、形態(tài)一致。

 

備注:如該培養(yǎng)基用于控制菌白色念珠菌的檢查時,同時需要滿足捌菌項下培養(yǎng)基適用性檢查要求。

 

5、沙氏葡萄糖瓊脂+抗生素

 

無菌性檢查:取已滅菌的SDA注皿,于20-25℃培養(yǎng)5天,應(yīng)無菌落生長。

 

試驗用菌種:

 

抑菌性檢查:枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌

 

促生長能力:白色念珠菌、黑曲霉 。

 

常用抗生素:

 

1)慶大霉素:廣譜。對G-,G+菌有較好的抗菌作用。

 

2)氯霉素:廣譜。對G-菌作用強;對G+菌作用不及青霉素與四環(huán)素。

 

接種方法:

 

抑菌性:接種枯草、金葡、銅綠菌懸液不少于100cfu。

 

促生長能力:接種白色念珠菌、黑曲霉菌懸液不大于100cfu。

 

適用性檢查:

 

白色念珠菌、黑曲霉于20-25℃培養(yǎng)不大于5天。

 

與對照培養(yǎng)基比較,菌落平均數(shù)比值在0.5-2范圍內(nèi)。

 

判斷標(biāo)準(zhǔn):枯草芽孢桿菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌不得生長。

 

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