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一個(gè)月 |
應(yīng)用領(lǐng)域 |
化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
人熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒借 ELISA 技術(shù)，精準(zhǔn)測(cè) HSP gp96 含量。操作規(guī)范，用于腫瘤、感染、自身免疫病研究，助力診療與科研。
人熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒
人熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒，是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域用于精準(zhǔn)測(cè)定人體樣本中人熱休克蛋白糖蛋白 96（HSP gp96）含量的關(guān)鍵工具。HSP gp96 作為熱休克蛋白家族中的重要成員，具有高度保守性，在細(xì)胞的生理與病理過(guò)程中發(fā)揮著舉足輕重的作用。它不僅參與蛋白質(zhì)的折疊、轉(zhuǎn)運(yùn)及質(zhì)量控制，維持細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)，還在免疫調(diào)節(jié)、腫瘤發(fā)生發(fā)展以及感染性疾病進(jìn)程中扮演關(guān)鍵角色。準(zhǔn)確檢測(cè) HSP gp96 含量，對(duì)深入探究相關(guān)生理病理機(jī)制、疾病診斷與治療效果評(píng)估意義重大。
該試劑盒基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）原理設(shè)計(jì)。試劑盒內(nèi)的酶標(biāo)板預(yù)先包被有針對(duì) HSP gp96 的高特異性抗體。當(dāng)含有 HSP gp96 的樣本，如血清、血漿、細(xì)胞裂解液或組織勻漿等加入酶標(biāo)板孔中時(shí)，樣本里的 HSP gp96 抗原會(huì)迅速與包被抗體特異性結(jié)合，形成抗原 - 抗體復(fù)合物。隨后加入酶標(biāo)記的另一種針對(duì) HSP gp96 的抗體，該抗體能夠識(shí)別已結(jié)合在包被抗體上的 HSP gp96，進(jìn)而構(gòu)建起穩(wěn)定的抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。加入酶的底物后，在酶的催化作用下，底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顏色的深淺與樣本中 HSP gp96 的含量呈正相關(guān)。通過(guò)酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，并與試劑盒所提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比對(duì)，即可精確計(jì)算出樣本中 HSP gp96 的含量。
在操作流程方面，規(guī)范采集樣本是關(guān)鍵的第一步。以血清樣本采集為例，采血時(shí)需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范，使用無(wú)熱原、無(wú)污染的采xue器具。采集后，應(yīng)及時(shí)將血液標(biāo)本送往實(shí)驗(yàn)室，并在規(guī)定時(shí)間內(nèi)分離血清，避免樣本長(zhǎng)時(shí)間放置導(dǎo)致 HSP gp96 結(jié)構(gòu)改變或降解，影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。從冷藏環(huán)境取出試劑盒后，需將其置于室溫環(huán)境平衡一段時(shí)間，使試劑盒各組分達(dá)到適宜的反應(yīng)溫度。嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)，精確吸取適量樣本、不同濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)品以及空白對(duì)照，分別加入酶標(biāo)板相應(yīng)孔中。加入酶標(biāo)抗體后，輕輕振蕩使反應(yīng)體系充分混勻，然后將酶標(biāo)板放入 37℃恒溫孵育箱中，孵育特定時(shí)間，確保抗原抗體反應(yīng)充分進(jìn)行。孵育結(jié)束，用洗滌緩沖液多次洗滌酶標(biāo)板，徹di清除未結(jié)合的多余物質(zhì)，降低非特異性干擾。緊接著加入底物溶液，在避光條件下進(jìn)行顯色反應(yīng)，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)迅速用酶標(biāo)儀讀取各孔吸光度數(shù)值，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)確定樣本中 HSP gp96 的濃度。
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