上海酶澳生物科技有限公司（品牌名：MEIAOBIO）是一家專注于生命科學(xué)領(lǐng)域的高科技企業(yè)，致力于為全球科研機(jī)構(gòu)、醫(yī)療機(jī)構(gòu)及工業(yè)用戶提供高品質(zhì)、創(chuàng)新性的生物試劑和解決方案。依托上海作為國(guó)際科技創(chuàng)新中心的優(yōu)勢(shì)，公司匯聚了行業(yè)頂尖的技術(shù)團(tuán)隊(duì)與研發(fā)資源，以專業(yè)、精準(zhǔn)、可靠的服務(wù)理念，助力生命科學(xué)研究與產(chǎn)業(yè)發(fā)展。 核心產(chǎn)品領(lǐng)域 MEIAOBIO主營(yíng)產(chǎn)品涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫檢測(cè)及生物樣本庫(kù)四大方向，主要包括： ELISA試劑盒：高靈敏度、高特異性的檢測(cè)工具，廣泛應(yīng)用于疾病標(biāo)志物、細(xì)胞因子、激素等分析。 生化試劑盒：覆蓋代謝通路、酶活性檢測(cè)等領(lǐng)域，支持基礎(chǔ)研究與工業(yè)質(zhì)檢需求。 PCR試劑盒：提供快速、精準(zhǔn)的核酸擴(kuò)增解決方案，適用于基因克隆、病原體檢測(cè)及表達(dá)分析。 生物樣本庫(kù)產(chǎn)品：包括細(xì)胞株、標(biāo)準(zhǔn)化血清、微生物菌種及生化試劑，確保實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性與數(shù)據(jù)可靠性。 技術(shù)實(shí)力與品質(zhì)保障 公司以技術(shù)創(chuàng)新為核心驅(qū)動(dòng)力，建立了嚴(yán)格的質(zhì)控體系。同時(shí)，MEIAOBIO與國(guó)內(nèi)外科研機(jī)構(gòu)及高校保持緊密合作，持續(xù)優(yōu)化產(chǎn)品性能，推動(dòng)技術(shù)迭代，確保為用戶提供前沿、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)工具。 服務(wù)理念 MEIAOBIO秉承“以客戶為中心"的服務(wù)宗旨，提供定制化實(shí)驗(yàn)方案、專業(yè)的技術(shù)指導(dǎo)及高效的物流支持。從產(chǎn)品選型到售后跟蹤，全程為客戶提供一站式解決方案，助力科研效率提升與成果轉(zhuǎn)化。 愿景與使命 未來(lái)，MEIAOBIO將持續(xù)深耕生命科學(xué)領(lǐng)域，以創(chuàng)新技術(shù)賦能全球科研與醫(yī)療事業(yè)，推動(dòng)精準(zhǔn)醫(yī)學(xué)、生物醫(yī)藥等產(chǎn)業(yè)的進(jìn)步，為人類健康與社會(huì)發(fā)展貢獻(xiàn)力量。 品牌定位：專業(yè)、信賴、創(chuàng)新的生物科技解決方案提供者。 品牌承諾：品質(zhì)為本，服務(wù)為基，助力每一次科學(xué)探索！
人布魯氏桿菌(Brucella)elisa試劑盒 說(shuō)明書(shū)

一、ELISA試劑盒的核心組成

ELISA試劑盒通常包含以下關(guān)鍵組分，不同類型的試劑盒（如夾心法、間接法等）可能略有差異：

1. 包被板：表面包被有特異性抗體（或抗原）的96孔（材質(zhì)多為聚苯乙烯），用于捕獲樣本中的目標(biāo)分子。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品/校準(zhǔn)品：已知濃度的目標(biāo)分子（如重組抗原、純化抗體），用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，量化樣本中目標(biāo)分子的濃度。
3. 檢測(cè)抗體：針對(duì)目標(biāo)分子的特異性抗體（常與酶標(biāo)記，如HRP辣根過(guò)氧化物酶、AP堿性磷酸酶）。
4. 酶結(jié)合物稀釋液：用于稀釋酶標(biāo)記抗體的緩沖液。
5. 底物溶液：酶催化的底物（如HRP對(duì)應(yīng)的TMB顯色液、OPD顯色液；AP對(duì)應(yīng)的PNPP顯色液），反應(yīng)后生成有色產(chǎn)物。
6. 終止液：終止酶促反應(yīng)，固定顯色結(jié)果。
7. 洗滌液（PBST或TBST）：用于洗去未結(jié)合的非特異性物質(zhì)，減少背景干擾。
8. 封閉液：包被后封閉微孔板未結(jié)合位點(diǎn)，防止非特異性吸附。
9. 樣本稀釋液：用于稀釋待測(cè)樣本（如血清、血漿、組織勻漿等），匹配反應(yīng)體系。

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二、ELISA的檢測(cè)原理

ELISA的核心是抗原-抗體的特異性結(jié)合與酶促顯色反應(yīng)的偶聯(lián)，主要步驟如下（以“夾心法"為例）：

1. 包被：將特異性抗體（捕獲抗體）包被于微孔板表面，形成固相抗體。
2. 封閉：加入封閉液，填充抗體未結(jié)合的位點(diǎn)，避免樣本中雜蛋白非特異性吸附。
3. 加樣：加入待測(cè)樣本（含目標(biāo)抗原）或標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的抗原與固相抗體結(jié)合。
4. 孵育與洗滌：室溫或37℃孵育，使抗原-抗體充分結(jié)合；洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)。
5. 加檢測(cè)抗體：加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體（與目標(biāo)抗原的另一表位結(jié)合），形成“固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物（夾心結(jié)構(gòu)）。
6. 再次洗滌：去除未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。
7. 加底物顯色：加入底物溶液，酶（如HRP）催化底物生成有色產(chǎn)物（顏色深淺與目標(biāo)抗原濃度正相關(guān)）。
8. 終止反應(yīng)：加入終止液（如硫酸），停止顯色反應(yīng)。
9. 讀數(shù)分析：用酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)（如HRP對(duì)應(yīng)450nm）測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中目標(biāo)抗原的濃度。

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三、ELISA的主要類型

根據(jù)檢測(cè)目標(biāo)（抗原/抗體）和反應(yīng)原理的不同，ELISA可分為以下幾類：

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四、操作注意事項(xiàng)

為確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，需注意以下關(guān)鍵點(diǎn)：

1. 樣本處理：避免溶血、脂血或溶菌酶干擾；樣本需按說(shuō)明書(shū)要求稀釋。
2. 溫育條件：嚴(yán)格控制溫度（通常37℃）和時(shí)間（30分鐘-2小時(shí)），避免溫度波動(dòng)或時(shí)間不足/過(guò)長(zhǎng)。
3. 洗滌操作：洗滌不充分會(huì)導(dǎo)致背景高，過(guò)度洗滌可能洗脫結(jié)合物；建議使用洗板機(jī)（設(shè)置5次洗滌，每次30秒）。
4. 顯色控制：底物需避光保存，顯色時(shí)間需根據(jù)樣本濃度調(diào)整。
5. 對(duì)照設(shè)置：必須設(shè)置空白對(duì)照、陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照及標(biāo)準(zhǔn)品，用于驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)有效性。

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五、質(zhì)量控制與結(jié)果解讀

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線：以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（通常為S型曲線），計(jì)算樣本的OD值對(duì)應(yīng)的濃度（需注意線性范圍，超出范圍需稀釋或濃縮樣本）。
2. 靈敏度與特異性：靈敏度（zui低檢測(cè)限）和特異性（與類似物的交叉反應(yīng)率）是評(píng)價(jià)試劑盒性能的核心指標(biāo)，需參考說(shuō)明書(shū)或通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。
3. 數(shù)據(jù)有效性：若標(biāo)準(zhǔn)曲線的R2＜0.99、陰性對(duì)照OD值過(guò)高（＞0.1）或陽(yáng)性對(duì)照未達(dá)標(biāo)，需重新實(shí)驗(yàn)。

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六、應(yīng)用領(lǐng)域

• 科研領(lǐng)域:僅供科學(xué)研究。

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七、選擇ELISA試劑盒的建議

• 明確檢測(cè)目標(biāo)：是抗原（如病毒蛋白）還是抗體（如IgG/IgM）？小分子（如藥物）需選競(jìng)爭(zhēng)法試劑盒。
• 樣本類型：血清、血漿、組織勻漿或細(xì)胞上清？需選擇匹配的樣本稀釋液。
• 性能需求：定量檢測(cè)需關(guān)注線性范圍和重復(fù)性；定性檢測(cè)可側(cè)重臨界值（Cut-off）設(shè)定。

人布魯氏桿菌(Brucella)elisa試劑盒 說(shuō)明書(shū)


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