土壤堿性木聚糖酶（Soil Basic Xylanase，S-BAX）測定試劑盒說明書

微量法 100T/48S

土壤堿性木聚糖酶測定試劑盒

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定測定意義：

木聚糖酶(EC 3.2.1.8)主要由微生物產(chǎn)生，能催化水解木聚糖，也被稱為戊聚糖酶或半纖維素酶，可分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料中的非淀粉多糖，促進營養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用，因而廣泛的應用于釀造和飼料工業(yè)中，BAX 一般分離自最適生長pH 為 9 -11 的微生物。

測定原理：

BAX 在堿性環(huán)境中催化木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下進一步與 3,5-二硝基水楊酸發(fā)生顯色反應，在 540nm 處有特征吸收峰，反應液顏色的深淺與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，通過測定反應液在 540nm 吸光值增加速率，可計算BAX 活力。

組成：

自備儀器和用品：

天平、常溫離心機、震蕩儀、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標儀、微量石英比色皿/96 孔板。

樣品處理：

新鮮土樣風干，過 30-50 目篩。

測定操作表：

1、分光光度計/酶標儀預熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 540nm。

2、操作表

S-BAX 計算公式：

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下標準曲線：y = 2.8432x - 0.0293，R² = 0.9985

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生 1μmol 還原糖所需的酶量為一個酶活單位。

S-BAX 活力（μmol/d /g 土樣）=（△A+0.0293）÷ 2.8432×V 反總×10³÷ W÷T÷ 150

= 16.88×（A540+0.0058）÷ W

V 反總：反應總體積，0.15ml；T：反應時間，1/48d；1000：1mmol/L =10³μmol/L；150：木糖分子量。 b.用 96 孔板測定的計算公式如下

標準曲線：y = 1.4216x - 0.0293，R² = 0.9985

酶活定義：50℃，pH9.0 條件下，每克土壤每天分解木聚糖產(chǎn)生 1μmol 還原糖所需的酶量為一個酶活單位。

S-BAX 活力（μmol/d /g 土樣）=（△A+0.0293）÷ 1.4216×V 反總×10³÷ W÷T÷ 150

= 33.76×（A540+0.0058）÷ W

V 反總：反應總體積，0.15ml；T：反應時間，1/48d；1000：1mmol/L =10³μmol/L；150：木糖分子量。

注意事項：

保證震蕩反應 30min，使酶與底物充分接觸。

注意 90℃水浴防止爆開，以免改變反應體系。

土壤堿性木聚糖酶測定試劑盒