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29次dànbáizhì的等電點(diǎn)(Isoelectric Point, pI)是dànbáizhì在溶液中呈電中性、凈電荷為零的pH值。測(cè)定dànbáizhì的等電點(diǎn)對(duì)于理解dànbáizhì的化學(xué)性質(zhì)、進(jìn)行dànbáizhì純化和分析等方面都是非常重要的。以下是一些用于測(cè)定dànbáizhì等電點(diǎn)的常用方法:
1. 等電聚焦電泳 (IEF)
等電聚焦電泳是一種基于dànbáizhì在其等電點(diǎn)pH下不遷移的原理的技術(shù)。在一個(gè)pH梯度的凝膠中,dànbáizhì將在其等電點(diǎn)位置聚焦。通過知道dànbáizhì在凝膠中的遷移,可以確定其pI。
2.二維凝膠電泳 (2D-PAGE)
在二維凝膠電泳中,dìyī維通常是IEF,而第二維是SDS-PAGE。通過比較dànbáizhì在兩個(gè)維度的遷移,可以同時(shí)獲取dànbáizhì的分子量和等電點(diǎn)信息
3. 計(jì)算預(yù)測(cè)
基于dànbáizhì的氨基酸序列,可以使用一些在線工具或軟件來計(jì)算dànbáizhì的理論等電點(diǎn)。
4. pH差分法
利用dànbáizhì在其等電點(diǎn)上凈電荷為零的特性,在不同pH的緩沖液中觀測(cè)dànbáizhì的溶解度或其他性質(zhì)的變化,找到dànbáizhì性質(zhì)發(fā)生顯著變化的pH點(diǎn),即等電點(diǎn)。
5. 毛細(xì)管等電聚焦電泳(Capillary Isoelectric Focusing, cIEF)
cIEF是一種微管道等電聚焦技術(shù),在一定范圍內(nèi)的pH梯度中,dànbáizhì將在其等電點(diǎn)進(jìn)行聚焦。該技術(shù)允許在較短的時(shí)間內(nèi)獲得關(guān)于dànbáizhì等電點(diǎn)的jīngquè信息。
圖1
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