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兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X8360 主要用途 僅供科研研究實驗
兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品:人膠質(zhì)母細胞瘤+LUC;T98G-LUC-PURO IWS1蛋白抗體 人膠質(zhì)瘤組織源細胞 惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體 大鼠嗅球神經(jīng)元細胞 FAS凋亡抑制分子1抗體 人外周血來源內(nèi)皮祖細胞 核受體輔助抑制因子2抗體

詳細介紹

兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細胞形態(tài)

貨號

骨髓

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

YS-01X8360

細胞簡介:

兔骨髓樹突狀分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應(yīng)中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細胞的第二信號,可導(dǎo)致T細胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。

方法簡介:

實驗室分離的兔骨髓未成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導(dǎo)而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測:

實驗室分離的兔骨髓樹突狀(未成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細胞形態(tài)等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

換液頻率:每2-3天換液一次

生長特性:半貼壁半懸浮

細胞形態(tài):圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣

傳代特性:屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液:0.25%

培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

兔骨髓樹突狀 (未成熟DC細胞)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)

細胞傳代及凍存:

細胞傳代步驟細胞凍存步驟
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)


公司正在出售的產(chǎn)品:

人足盂蛋白(PCX)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human PCX (Podocalyxin) ELISA Kit

人組織多肽抗原(TPA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TPA (Tissue Polypeptide Aigen) ELISA Kit

人組織多肽特異性抗原(TPS)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human TPS (Tissue Polypeptide Specific Aigen) ELISA Kit

人清道夫受體B類成員1(SCARB1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human SCARB1 (Scavenger receptor class B member 1) ELISA kit

DIRAS2蛋白抗體

高遷移率族蛋白2抗體

CXCL2重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽) Protein

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)

ADAMTSL1重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

EDA2R Pro僀?僀

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.2mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)

IL21 Protein Human 重組人 Interleukin-21 / IL-21 蛋白

CXCL2重組小鼠 CXCL2 / GRO2 / MIP-2 蛋白 (His & SUMO 標簽) Protein

EDA2R Protein Rat 重組大鼠 XEDAR / EDA2R 蛋白 (Fc 標簽)

ADAMTSL1重組人 ADAMTSL1 / PUNCTIN 蛋白 Protein

豚鼠壞死因子α(TNF-α)試劑盒 ,英文名: TNF-α ELISA Kit

Human protein kinase C (PKC) ELISA Kit 人蛋白激酶C(PKC)試劑盒

Monkeyα1-microglobulin,α1-MGELISAKitα1微球蛋白(α1-MG)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitforBMP-6ELISAKit大鼠骨形成蛋白6

細菌鎂ATP(Mg++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20

Rabbitmyelinbasicprotein,MBPELISAKit兔子髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

兔骨髓樹突狀細胞 (未成熟DC細胞)小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 試劑盒

Human vitamin A (VA) ELISA Kit A(VA)試劑盒

HumanCathepsinK,cath-KELISAKit 人組織蛋白酶K(cath-K)pcr檢測試劑盒分裝

HumancecropinB,CecB試劑盒人殺菌肽B(CecB)試劑盒規(guī)格:96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米GA21品系試劑盒20

HumanSerumamyloidP,SAPELISAKit人血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

原代細胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;

  7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;

  3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;

  4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;

  5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行



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