一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（綠熒光）產(chǎn)品描述

細(xì)胞凋亡（Apoptosis）的一個特點是細(xì)胞染色體DNA的降解，在一些內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶的作用下，核小體間的DNA被切斷，從而產(chǎn)生不同長度的寡聚核小體片段，表現(xiàn)為瓊脂糖凝膠電泳中呈現(xiàn)特異的180-200 bp DNA Ladder圖譜，而壞死細(xì)胞的DNA呈彌漫的連續(xù)圖譜。

美侖一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(One Step TUNEL Apoptosis Assay Kit)采用TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick End Labeling)方法，其原理為：末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡細(xì)胞斷裂DNA的3´-羥基(3´-OH)末端催化摻入熒光素-12-脫氧三磷酸尿苷(FITC-12-dUTP)。FITC-12-dUTP標(biāo)記的DNA可以用熒光顯微鏡直接觀察或者用流式細(xì)胞儀定量檢測。以50μl加樣量為標(biāo)準(zhǔn)，本試劑盒可測定20次。

一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（綠熒光）產(chǎn)品優(yōu)勢

使用方便快捷，對于經(jīng)過固定和洗滌的組織樣本（石蠟切片、冰凍切片）和細(xì)胞樣本（貼壁細(xì)胞、懸浮細(xì)胞），只需經(jīng)過一步染色，洗滌后便可以進(jìn)行凋亡檢測。

★  本試劑盒還提供了DNase I陽性對照和Proteinase K，以便操作。

★  靈敏度好、特異性好、檢測效果好。

對照實驗：采用某國內(nèi)TUNEL檢測試劑盒作為對照，在相同的實驗條件下，用Apoptosis Activator 2處理C6細(xì)胞，熒光顯微鏡觀察細(xì)胞凋亡后的熒光染色狀況。

檢測結(jié)果：美侖一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒靈敏度高，染色效果更好。

保存條件

-20℃避光保存，有效期一年。

操作方法

請參考說明書。

注意事項

1.配制TUNEL檢測液之后的步驟注意避光操作。

2.若配制TUNEL檢測液操作時間較長，請將TdT Enzyme (10×)、FITC-12-dUTP Labeling Mix和配好的檢測液置于冰上暫時保存。

3.需自備PBS或HBSS，抗熒光衰減封片劑（美侖貨號：MA0221或MA0222），組織固定液（美侖貨號：MA0192）或4%多聚甲醛，Triton X-100，二甲苯，無水乙醇等。

4.PBS或HBSS清洗后，為了各種反應(yīng)的有效進(jìn)行，請盡量除去PBS或HBSS溶液后再進(jìn)行下一步反應(yīng)。

5.結(jié)果分析時注意：在壞死的晚期階段或在高度增殖/代謝的組織細(xì)胞中可產(chǎn)生大量DNA，從而引起假陽性結(jié)果；而有些類型的凋亡性細(xì)胞死亡缺乏DNA斷裂或DNA裂解不*，以及細(xì)胞外的矩陣成分阻止TdT進(jìn)入胞內(nèi)反應(yīng)，進(jìn)而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

6.為了您的安全和健康，操作時請穿著實驗服并佩戴一次性手套。

本產(chǎn)品僅用于科研