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供貨周期	現(xiàn)貨	應(yīng)用領(lǐng)域	化工,生物產(chǎn)業(yè)

大鼠平足蛋白(PDPN) ELISA試劑盒詳細(xì)介紹：

[規(guī)格]：48T/96T

品牌：瑞番

[檢測波長]：450nm

[保存條件]：2-8°，六個(gè)月

[產(chǎn)品用途]：僅供科研使用

[檢測目的]：用于測定血清，血漿，胸腹水等相關(guān)液體標(biāo)本

[特點(diǎn)]：敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。

瑞番供應(yīng)的種屬有：人，雞，鴨，魚，馬，兔豬，植物等ELISA試劑盒等等

[標(biāo)本處理]:

1. 本公司只對試劑盒本身負(fù)責(zé)，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負(fù)責(zé)，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預(yù)留充足的樣本。

2. 實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測標(biāo)本含量，如果標(biāo)本濃度過高，應(yīng)對標(biāo)本進(jìn)行稀釋，使稀釋后的標(biāo)本符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。標(biāo)本使用0.01mol/L的PBS稀釋(PH=7.0-7.2)。

3. 若所檢樣本不包含在說明書所列樣本之中，建議進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證其有效性，并注意留存樣本。

4. 使用化學(xué)裂解液制備的組織勻漿或細(xì)胞提取液可能會由于某些化學(xué)物質(zhì)的引入導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

5. 若樣本為細(xì)胞培養(yǎng)上清，因該類樣本干擾因素較多，如：細(xì)胞狀態(tài)、細(xì)胞數(shù)量、采樣時(shí)間等，所以可能存在檢測不出的情況。

6. 某些天然蛋白或重組蛋白，包括原核及真核重組蛋白，可能因?yàn)榕c本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配，而不被檢測出。

7. 建議使用新鮮樣本，保存時(shí)間過長可能會存在蛋白降解或變性導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果偏差。

[操作步驟]：

1、加樣：分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

2、溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。

3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用

4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此

重復(fù)5次，拍干。

5、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

6、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

10 分鐘.

7、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

8、測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

[大鼠平足蛋白(PDPN) ELISA試劑盒問題解答]：

若實(shí)驗(yàn)效果不好，請及時(shí)對顯色結(jié)果拍照，保留所用板條及未使用試劑，并妥善保存，然后聯(lián)系我公司技術(shù)支持為您解決問題。同時(shí)您也可以參考以下資料：

問題如下	可能原因	解決方案
1：標(biāo)準(zhǔn)曲線差？	1吸取及洗滌不充分 2移液不精準(zhǔn)	1充分的吸取及洗滌 2檢查和校正移液器
2：精密度低？	1洗滌不充分 2混勻不充分和吸取試劑不足 3重復(fù)利用吸頭、容器和覆膜加樣不精確	1充分混勻和吸取試劑 2使用加樣器要更換新的吸頭、使用新的容器和覆膜 3檢查和校正移液器
3：OD值低？	1溫育時(shí)間不正確 2溫育溫度不正確 3酶標(biāo)記物或底物失效 4沒有加入終止液 5超出讀數(shù)時(shí)間讀數(shù)	1保證充足的溫育時(shí)間 2試劑要平衡至室溫并保證的溫育溫度 3通過混合酶標(biāo)記物和底物，顏色應(yīng)迅速顯現(xiàn)來檢查 4按照說明書實(shí)驗(yàn)操作步驟加入終止液 5在說明書推薦的讀數(shù)時(shí)間內(nèi)讀數(shù)

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