目錄:上海牧榮生物科技有限公司>>實(shí)驗(yàn)試劑>>其他試劑>> M3150.0200用于 qPCR 的不含 ROX 的 GreenMasterMix FAST
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更新時(shí)間：2025-05-12 16:21:38瀏覽次數(shù)：21評(píng)價(jià)
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | M3150.0200 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
GreenMasterMix FAST，不含 ROX，可在所有常見模塊系統(tǒng)中使用無探針的實(shí)時(shí)熒光定量 PCR。該預(yù)混液設(shè)計(jì)用于快速 qPCR，變性時(shí)間短，采用兩步法 PCR 方案。我們的不含 ROX 的 GreenMasterMix 包含嵌入熒光染料和進(jìn)行定量 PCR 所需的所有組分。
Genaxxon GreenMasterMix 中使用的 HotStart Taq 聚合酶的優(yōu)勢(shì)：
熱啟動(dòng)技術(shù)，用于在室溫下構(gòu)建。
初始變性時(shí)間短，為 2 分鐘或更短
針對(duì) 2 步法 PCR 方案進(jìn)行了優(yōu)化
無需在冰上移液
無需立即進(jìn)一步處理 （PCR）。移液式 PCR 方法可以在 RT 中放置長達(dá) 3 天。
擴(kuò)增富含 GC 的模板
高產(chǎn)
無引物二聚體形成
Genaxxon 熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶具有便利性和實(shí)用性，可實(shí)現(xiàn)一致的效率和特異性：
1。它在低溫下抑制聚合酶，從而可靠地防止非特異性 PCR 反應(yīng)。因此，PCR 設(shè)置不必在冰上進(jìn)行。
2. 這意味著 PCR 方法可以在 RT（20°C 至 25°C）下混合并儲(chǔ)存長達(dá) 3 天，而不會(huì)影響最終結(jié)果（例如，在午休期間或等待更多樣品時(shí)）。
不含 ROX 的 Green qPCR 預(yù)混液包含進(jìn)行定量 PCR 所需的所有組分，含量經(jīng)過優(yōu)化。
熱啟動(dòng) Taq DNA 聚合酶
dATP、dCTP、dGTP、dTTP
插層綠色熒光染料
優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液
穩(wěn)定劑和增強(qiáng)劑，可實(shí)現(xiàn)低拷貝數(shù)靶標(biāo)的擴(kuò)增
1 mL 的小等分試樣簡化了處理和儲(chǔ)存（每個(gè)等分試樣的凍融循環(huán)次數(shù)更少）。
特別適用于：BioRad CFX96 Touch™、CFX384 Touch™、CFX Connect™、DNA Engine Opticon® 2、Chromo4™、iCycler iQ™ 和 My iQ™、Roche LightCycler® 480、LightCycler® 1536、LightCycler® Nano、LightCycler® 96 和 QuantStudio™ 儀器、Thermo Scientific™ PikoReal™、Cepheid SmartCycler®、Bio Molecular Systems Mic qPCR 循環(huán)儀、Qiagen Rotor Gene Q、Rotor Gene 6000、MyGo Mini 和 MyGo Pro。
規(guī)格：
該實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 預(yù)混液為即用型 2 時(shí)間預(yù)混液，不含 ROX™
，適用于使用 MIC Cycler 進(jìn)行 FAST PCR
初始變性時(shí)間
短，針對(duì) 2 步法 qPCR
優(yōu)化，等分試樣大?。? mL。
PCR 引物延伸 多重 PCR 低拷貝靶標(biāo) PCR 實(shí)時(shí)熒光定量 PCR
One unit is defined as the amount of enzyme which will convert 10 nmoles of dNTPs to an acid-insoluble form in 30 min at 72°C under the assay conditions (25 mM TAPS (tris-(hydroxymethyl)-methyl-amino-propanesulfonic acid, sodium salt) pH 9.3 (25°C); 50 mM KCl; 2 mM MgCl2; 1 mM b-mercaptoethanol; and activated calf thymus DNA as substrate.
eclass-Nr: 32-16-05-02
技巧
快速 PCR：
在進(jìn)行快速實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 時(shí)，考慮引物設(shè)計(jì)和靶標(biāo)大小非常重要。為了在快速循環(huán)條件下進(jìn)行高效擴(kuò)增，建議靶標(biāo)大小在 70 bp 至 200 bp 之間。目標(biāo)長度越短，總運(yùn)行時(shí)間越快。對(duì)于其他靶標(biāo)和其他引物組，必須通過實(shí)驗(yàn)確定退火步驟。
請(qǐng)使用以下方案作為靈感，因?yàn)槟枰鶕?jù)您的目標(biāo)大小和應(yīng)用的儀器優(yōu)化儀器設(shè)置。
在 LightCycler® 96 上使用 Genaxxon 預(yù)混液（不含 ROX）快速獲得實(shí)時(shí) PCR 結(jié)果
使用 LighCycler96 （Roche） 使用快速循環(huán)實(shí)時(shí) 2 步方案對(duì)不含 ROX 的 GreenMasterMix （2X） 或不含 ROX 的 ProbeMasterMix （2X） 進(jìn)行了測(cè)試;分別為快速 PAH12 Green LC 和快速 Pthr 探針 LC。
qPCR 設(shè)置：使用 GreenMasterMix （2X）（不含 ROX）或 ProbeMasterMix （2X）（不含 ROX），靶向 PAH12 （203 bp） 或 Pthr （75 bp） 的引物和 4 種濃度的 gDNA（40 ng、20 ng、10 ng 和 5 ng）。所有 DNA 濃度均以四次重復(fù)測(cè)試。見圖 1 和圖 2。PCR 反應(yīng)混合物在 LightCycler® 96 上運(yùn)行（對(duì) ROX 無要求）。所應(yīng)用快速方案的儀器設(shè)置、運(yùn)行時(shí)間和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);將 Fast PAH12 Green LC 和 Fast Pthr 探針 LC 與標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行比較;標(biāo)準(zhǔn) Pthr LC。見表 1.結(jié)果
：標(biāo)準(zhǔn) Fast Pthr 探針 LC 方案的運(yùn)行時(shí)間為 80.8 分鐘。快速 PAH12 綠色液相色譜和快速 Pthr 探針液相色譜方案的運(yùn)行時(shí)間分別為 47.5 和 40.8 分鐘。所有協(xié)議時(shí)間均包括 samping 時(shí)間和 15 分鐘熱啟動(dòng)。如表 1 所示，F(xiàn)ast PAH12 Green LC 和 Fast Pthr Probe LC 方案的確定標(biāo)準(zhǔn)令人滿意。此外，使用不含 ROX 的 Green 2x 預(yù)混液和快速 PAH12 Green 液相色譜方案進(jìn)行的熔解曲線分析證實(shí)了高特異性。
在 -20°C 下儲(chǔ)存。 僅供實(shí)驗(yàn)室使用！
上海牧榮生物科技有限公司 是一家專注于分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)菌學(xué)、遺傳學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白質(zhì)學(xué)、細(xì)胞治療、臨床應(yīng)用等領(lǐng)域，以銷售為主的生物技術(shù)公司。銷售的產(chǎn)品涉及，細(xì)胞株和菌株、胎牛血清、生化試劑、ELISA試劑盒、抗體和抗原、細(xì)胞因子、技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)耗材和消耗品、儀器設(shè)備等?？蛻舯椴即髮W(xué)、研究所、醫(yī)院、衛(wèi)生防疫、商品檢驗(yàn)檢疫、制藥公司、生物技術(shù)公司和食品工業(yè)等單位。
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