化工儀器網(wǎng)技術(shù)文章
MS-MLPA的原理
閱讀：26 發(fā)布時(shí)間：2025-6-9甲基化特異性MLPA (MS-MLPA) 是SALSA® MLPA®®技術(shù)的一種變體。通過MS-MLPA，可以同時(shí)對多個(gè)目標(biāo)進(jìn)行半定量的甲基化分析。
MS-MLPA 探針
如同常規(guī)MLPA探針混合物，MS-MLPA探針混合物包含靶向特定基因組序列的探針。每個(gè)探針由兩部分組成：左探針寡核苷酸（LPO）和右探針寡核苷酸（RPO）。MS-MLPA探針混合物中的某些探針靶向包含甲基化敏感性HhaI內(nèi)切酶限制位點(diǎn)的區(qū)域。這些探針可用于甲基化分析。
MS-MLPA的原理
探針與樣品DNA上的目標(biāo)序列雜交。然后使用HhaI酶消化未甲基化的雙鏈探針-DNA復(fù)合物。
與未甲基化樣本DNA形成的復(fù)合物會被消化。消化后的探針無法呈指數(shù)級擴(kuò)增，因此不會產(chǎn)生信號。與甲基化樣本DNA形成的復(fù)合物不會被HhaI消化，并將產(chǎn)生正常信號。
MS-MLPA 反應(yīng)
MS-MLPA 的步驟與MLPA的步驟非常相似。重要的區(qū)別是反應(yīng)在過夜雜交后被分為未消化和已消化的反應(yīng)。
未消化的反應(yīng)用于拷貝數(shù)測定。在消化反應(yīng)中，用于甲基化分析，HhaI酶與Ligase-65酶同時(shí)加入。
數(shù)據(jù)分析
Coffalyser™ 用于分析數(shù)據(jù)?？截悢?shù)與常規(guī) MLPA 的方法相同，通過未消化反應(yīng)來確定。DNA 樣品中的甲基化百分比是通過將消化反應(yīng)中的每個(gè)探針信號與未消化反應(yīng)中的相應(yīng)信號進(jìn)行比較來確定的。
完成
對您的MLPA數(shù)據(jù)進(jìn)行完整分析。
質(zhì)量
對您的樣品和實(shí)驗(yàn)進(jìn)行廣泛的的質(zhì)量控制。
Coffalyser™ 是 免費(fèi)的、用戶友好型 MLPA 分析軟件，由 MRC Holland 開發(fā)和支持，幫助您充分利用您的數(shù)據(jù)。
高級質(zhì)量控制
一個(gè)專為MLPA設(shè)計(jì)的高級質(zhì)量檢查系統(tǒng)幫助您評估從片段分離的質(zhì)量和MLPA反應(yīng)到參考樣品的再現(xiàn)性的一切內(nèi)容。這些檢查有助于防止您基于不良數(shù)據(jù)得出結(jié)論，并提高您對結(jié)果可靠性的信心。
可視化您的數(shù)據(jù)的所有方面
Coffalyser 允許您以多種方式可視化和分析您的數(shù)據(jù)。您可以查看電泳圖、表格，或?qū)Ｗ⒂趲в锌截悢?shù)比率的圖表。對于更復(fù)雜的病例和故障排除，您可以查看中間分析步驟的結(jié)果。要討論或存儲您的結(jié)果，您可以將總結(jié)導(dǎo)出為 PDF。
獲取新信息
關(guān)于我們的產(chǎn)品的新信息可以直接從Coffalyser內(nèi)部從我們的服務(wù)器獲取。這確保了您在收到新產(chǎn)品后即可開始分析。Coffalyser的更新始終是免費(fèi)的，確保您始終從新的見解中受益。
入門指南
要開始使用，請通過您的免費(fèi)賬戶生成一個(gè)免費(fèi)的許可證密鑰并下載Coffalyser。有關(guān)安裝幫助，請參閱我們的安裝手冊。有關(guān)如何開始進(jìn)行第一次分析的信息
分析證書
COA 版本 04；發(fā)布于 2021 年 5 月 28 日
SALSA MLPA
SALSA® MLPA® 試劑盒分析證書
目錄編號 | |
產(chǎn)品名稱 | SALSA MLPA 試劑盒 |
規(guī)格 | 100、500 或 2000 次反應(yīng) |
運(yùn)輸條件 | 干冰或冷卻元件 |
儲存條件 | 到貨后存放在 - 25°C 至 - 15°C 之間 |
有效期 | MLPA 試劑有效期：見附錄 A（在推薦條件下儲存時(shí)）。本產(chǎn)品凍融次數(shù)不得超過 25 次 |
用途 | 本試劑盒僅用于與 SALSA（MS-）MLPA 探針組合結(jié)合，按（MS-）MLPA 通用協(xié)議進(jìn)行（MS-）MLPA 分析 |
質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn) | - 使用專用質(zhì)量控制探針組合測試雜交速度、連接酶 - 65 活性和聚合酶活性。新舊批次之間的引物峰變異 < 20%。參考樣本群體內(nèi)和樣本群體內(nèi)的變異 < 10%（大標(biāo)準(zhǔn)差 0.10）。殘留引物 % 低于 40%。專用測試探針的探針比率在 0.8-1.2 之間。無 DNA 反應(yīng)僅顯示 64、70、76 和 82 nt 的對照片段。 |
測試結(jié)果 | 合格 |
本證書是生產(chǎn)過程中的分析聲明。所有檢測均按照制造商的使用說明進(jìn)行。本 COA 是適用于所有 SALSA MLPA 試劑盒批次的通用證書。有關(guān)批次詳情，請見附錄 A
品牌是MRC Holland MRC Holland北京z代理 MRC Holland 天津z代理 MRC Holland深圳z代理 MRC Holland 上海z代理 MRC Holland湖北z代理 MRC Holland湖南z代理 MRC Holland江蘇z代理 MRC Holland河南z代理 MRC Holland河北z代理 MRC Holland石家莊z代理 MRC Holland深圳z代理 MRC Holland廣東z代理