細(xì)胞STR鑒定檢測服務(wù)
1.基因組DNA: OD 260/280 在1.8～2.0之間, 濃度≥50ng/μl,體積≥20μl；
2.組織塊：介于綠豆粒~黃豆粒大小之間即可，
新鮮細(xì)胞：（1）細(xì)胞數(shù)≥106；（2）貼壁細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶消化后，離心收集細(xì)胞沉淀；（3）懸浮細(xì)胞直接離心收集細(xì)胞沉淀；（4）PBS清洗細(xì)胞沉淀，盡可能去除培養(yǎng)基與胰酶

細(xì)胞STR鑒定檢測服務(wù)

細(xì)胞STR鑒定檢測服務(wù)

送樣要求：

1. 基因組DNA: OD 260/280 在1.8～2.0之間, 濃度≥50ng/μl,體積≥20μl；

2. 組織塊：介于綠豆粒~黃豆粒大小之間即可，

3. 新鮮細(xì)胞：（1）細(xì)胞數(shù)≥10⁶；（2）貼壁細(xì)胞經(jīng)胰蛋白酶消化后，離心收集細(xì)胞沉淀；（3）懸浮細(xì)胞直接離心收集細(xì)胞沉淀；（4）PBS清洗細(xì)胞沉淀，盡可能去除培養(yǎng)基與胰酶；

4. 凍存細(xì)胞：細(xì)胞數(shù)≥10^6，凍存細(xì)胞從液氮罐中，37℃水浴復(fù)蘇，融化后離心收集細(xì)胞沉淀，盡可能去除凍存液，否則會影響DNA抽提質(zhì)量；

5. 樣本寄送：應(yīng)在送樣包裹中放置冰袋或干冰，建議順豐快遞；

6. 為了保證DNA抽提質(zhì)量，確保細(xì)胞在消化或凍存前，細(xì)胞狀態(tài)良好，處于生長對數(shù)期；

不建議以細(xì)胞懸液或細(xì)胞培養(yǎng)瓶形式寄送樣本

細(xì)胞STR鑒定樣本收集步驟參考

收集懸浮細(xì)胞沉淀步驟：

1.將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至離心管中

2. 200X g，離心10min，收集細(xì)胞

3. 移除上清液，用PBS清洗細(xì)胞沉淀1-2次

4. 最后200X g，離心10min，收集細(xì)胞沉淀

收集貼壁細(xì)胞沉淀步驟：

1.移除細(xì)胞培養(yǎng)基。

2.沿著培養(yǎng)皿壁緩慢加入PBS（無鈣鎂離子），勿將細(xì)胞沖離培養(yǎng)皿，溫和晃動培養(yǎng)皿，清洗細(xì)胞表面。

3.移除PBS。

4.加入細(xì)胞消化液（如胰蛋白酶等），使消化液能覆蓋所有細(xì)胞。在37℃孵育2-3min，溫和晃動培養(yǎng)皿知道細(xì)胞開始剝離培養(yǎng)皿。

5.加入培養(yǎng)基終止消化，溫和重懸細(xì)胞

6.200X g，離心10min，收集細(xì)胞

7.移除上清液，用PBS清洗細(xì)胞沉淀1-2次

8.最后200X g，離心10min，收集細(xì)胞沉淀

支原體檢測樣本制備：建議送檢上清

1.貼壁細(xì)胞上清液或細(xì)胞沉淀制備

貼壁細(xì)胞上清液制備：在無抗生素及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng) 3 天，匯合度達(dá)到90% 左右時，直接吸取  1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至  1.5ml 離心管中。

貼壁細(xì)胞沉淀制備：上述（a）貼壁細(xì)胞收取完上清后，加入1ml PBS，使用細(xì)胞刮刮取細(xì)胞，吸取轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管，12000rpm離心沉淀細(xì)胞。（如果使用胰酶消化細(xì)胞，需要10ml PBS洗三遍后，1ml PBS重懸沉淀，然后轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管，12000rpm離心獲得細(xì)胞沉淀。）

2.懸浮細(xì)胞上清液或細(xì)胞沉淀制備

懸浮細(xì)胞上清液制備：在無抗生素及其它抑菌或滅菌物質(zhì)條件下培養(yǎng) 3 天，500g離心5min，直接吸取  1.0ml 細(xì)胞培養(yǎng)上清液移至  2ml 離心管中。

懸浮細(xì)胞沉淀制備：上述（c）吸取上清液后的沉淀，加入1ml PBS重懸沉淀，然后轉(zhuǎn)移至1.5ml離心管，12000rpm離心10min，棄上清，獲得細(xì)胞沉淀。