大鼠Ⅱ型膠原抗體(ColⅡ-Ab)Elisa試劑盒是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體或抗原）與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

規(guī)格：48T   96T

檢 測 范 圍 ：7pg/ml-220pg/ml
使 用 目 的 ：本試劑盒用于測定山羊血清、血漿及相關液體樣本中小反芻獸疫抗體(PPRAb)含量。

標 本 要 求
1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能
馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融
2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

大鼠Ⅱ型膠原抗體(ColⅡ-Ab)Elisa試劑盒試劑及試劑配制
 1. 抗原及酶標記抗體 
①抗原： IgG 
②酶標抗抗體：羊抗鼠IgG-HRP 
2.包被液（CBS）：Na2CO3   0.8g，NaHCO3  1.46g，水溶解，定容500ml。  
3. 封閉液（3％BSA+CBS 或5％牛奶+CBS）：含3％牛血清白蛋白（BSA）：10mL CBS中加入0.3g BSA。含5％荷蘭牛奶：10mL CBS中加入0.5g牛奶 。 
4. 洗滌液（PBST 10*）：KH2PO4   4g，Na2HPO4·12H2O    58g，NaCl   160g， KCl  4g，Tween-20 10mL  加水定容2L。  
5. 洗滌液(1*PBS)： PBST：H2O=1：9 
6. 底物溶液（4甲基酰苯氨） ①TMB底物緩沖液(0.005mol/LPH3.6醋酸鈉-檸檬酸緩沖液)：稱NaAc·3H2O：1.13g，C6H8O7·H2O ：1.05g，用蒸餾水溶解，定容至1000mL，調(diào)PH=3.6。 ② TMB底物液：稱3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺（TMB）0.08g 溶于40mL 二甲基亞砜（DMSO）中，加60 mL 甲醇，混勻，加100mL 底物緩沖液，在暗處避光攪拌2小時至溶解，4℃避光保存。 ③H2O2 底物液：取140μL過氧化氫（H2O2）加入200mL底物緩沖液混勻。 ④底物應用液：現(xiàn)用現(xiàn)配，TMB:H2O2=1:1混勻。 
7. 終止液：2mol/L H2SO4 

大鼠Ⅱ型膠原抗體(ColⅡ-Ab)Elisa試劑盒操作步驟
 ①抗原包被過夜（12h以上）： IgG抗原，用包被液（CBS）稀釋，100μL/孔加入聚苯乙烯96孔反應板中。4℃放置過夜。 抗原用量：0.1μg*100N/抗原濃度 （N為板數(shù)）
②封閉：棄上清 加300μL/孔封閉液，37℃放置2h。 
③洗滌：用洗滌液洗3次 
④加一抗(待測樣品為細胞培養(yǎng)上清)：將含單克降抗體的細胞培養(yǎng)上清100μL /孔加到已包被的板上，空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品血清（1：200稀釋于1%BSA+PBST中）作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 測免疫效價待測樣品為小鼠血清時：采小鼠血液于常溫20min左右后放4℃至析出血清，3000r 10min離心。將含抗體的血清在已包被的板上用1%BSA+PBST連續(xù)倍比稀釋(按照1：200開始)，100μL /孔。每個樣品平行做兩份，小鼠陰性血清或空白培養(yǎng)基作為陰性對照，已知樣品作為陽性對照。37℃恒溫箱溫育2h。 
⑤洗滌：用洗滌液洗5次。 
⑥加二抗（酶標抗抗體）：羊抗鼠IgG-HRP，用1%BSA+PBST l ：10000稀釋，100μL／孔， 37℃恒溫箱溫育1h。
⑦洗滌：用洗滌液洗5次， 
⑧顯色：加新鮮配制的底物溶液(TMB:H2O2=1:1)100μL/孔，37℃恒溫箱放置10min，顯示藍色。 
⑨終止反應、比色：加30μL/孔H2SO4終止液．顏色變黃；用酶標儀測定450nm  630nm處各孔的吸光值，陽性反應的zui大稀釋度為待測樣品的效價。

大鼠Ⅱ型膠原抗體(ColⅡ-Ab)Elisa試劑盒相關產(chǎn)品如下：

B1000    牛腦微血管內(nèi)皮細胞    5 x 10^5 cells/vial
B2300    牛真皮成纖維細胞    1 x 10^6 cells/vial
ZQ0234    人食管癌細胞Eca-109    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0002    95-D人肺癌細胞(高轉(zhuǎn))    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0003    A549人非小細胞肺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0001    16HBE 人支氣管上皮細胞(atcc引進，代數(shù)靠前)    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0004    HELF人胚肺成纖維細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0433    HL-60人原髓細胞白血病細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0005    Hs888Lu人肺成纖維細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0006    MRC-5人胚肺細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0007    NCI-H1299人非小細胞肺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0008    NCI-H446人小細胞肺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0009    NCI-H1755人肺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0010    NCI-H838人肺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0011    NCI-H1563人胚肺細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0012    NCI-H2170人肺鱗癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0013    NCI-H596人肺鱗癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0014    NCI-H520人肺鱗癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0015    NCI-H1703人肺鱗癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0016    NCI-H226人肺鱗癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0017    NCI-H647人肺小細胞癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0018    SPC-A-1人肺腺癌細胞（暫不供應）    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0019    MHCC97-L人肝癌細胞（低轉(zhuǎn)）    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0020    MHCC97-H人肝癌細胞（高轉(zhuǎn)）    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0021    Bel-7404人肝癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0022    Hep-G2人肝癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0023    HCCLM3人肝癌細胞（高轉(zhuǎn)）    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0024    Hep 3B2.1-7人肝癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0025    huh-7人肝癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0027    PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0028    QGY-7703人肝癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0029    SMMC-7721人肝癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0030    SK-HEP-1人肝癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0031    LO2人正常肝細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0032    293FT人胚腎細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0033    293T人胚腎細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0034    HEK-293人胚腎細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0035    β-tc-6小鼠胰島素瘤胰島β細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0036    22RV1人前列腺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0037    DU 145人前列腺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0038    HS 1.Tes人正常睪丸細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0039    LNcapcloneFGC人前列腺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0040    PC-3人前列腺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0041    PC-3M人前列腺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0042    A375人惡性黑色素瘤細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0043    A431人表皮癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0044    Hacat人永生化表皮細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0045    M-14人黑色素瘤細胞(暫停銷售）    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0046    TE354.T人皮膚基底細胞癌    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0047    TE353.sk人正常皮膚細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0048    A172人膠質(zhì)母細胞瘤細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0049    Hs683人腦視神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0050    SH-SY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0480    CNE2人鼻咽癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0051    SK-N-AS人神經(jīng)母細胞瘤細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0481?    SW839?人腎癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0052    SHG-44人膠質(zhì)瘤細胞（不建議出售）    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0482?    HTR-8/SVneo 人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0053    U251人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0054    U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0484    人卵巢腺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0055    BGC-823人胃癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0485    人IgA-骨髓瘤細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0056?    Caco-2人結(jié)腸腺癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0486    人卵巢癌細胞    5 x 10^5 cells/vial
ZQ0057    HT-29人結(jié)腸癌細胞    5 x 10^5 cells/vial