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北京中檢葆泰生物技術有限公司
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《乳中乳過氧化物酶活性的測定 比色法》團體標準發(fā)布

時間:2022-5-31閱讀:1469
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2022年4月22日,《乳中乳過氧化物酶活性的測定 . 比色法》團體標準由中國食品科學技術學會發(fā)布,并正式實施。該標準由光明乳業(yè)股份有限公司、上海市農產品質量安全中心、北京中檢葆泰生物技術有限公司和內蒙古伊利實業(yè)集團股份有限公司共同起草。111.jpg


標準采用比色法檢測乳中乳過氧化物酶的活性,乳中乳過氧化物酶與底物3,3' ,5,5'-四甲基聯(lián)苯胺(TMB)發(fā)生氧化反應,生成藍色產物,加酸終止反應后溶液變成黃色。在450 nm下測定溶液的吸光度,乳過氧化物酶的活性與吸光度成正比,通過標準曲線定量計算其酶活性。

試劑和材料

乳過氧化物酶活性試劑,或Evergreen乳過氧化物酶活性試劑盒。注:Evergreen乳過氧化物酶活性試劑盒由北京中檢葆泰生物技術有限公司提供。

樣品提取

吸取10.00 mL樣品,置于15 mL離心管中,加入0.6 mL樣品處理溶液,渦旋混勻,靜置5~10 min,3000g離心10 min,用濾紙過濾,收集濾液待測。

測定

取出所需數(shù)量的微孔板,并做好標記。吸取50 μL濾液和系列標準溶液分別加至微孔中,加入50 μL乳過氧化物酶底物溶液(TMB),吹打混勻,室溫避光孵育15 min。孵育結束后,向每個微孔中加入100μL終止液,吹打混勻后,立即用酶標儀在450nm下讀取并記錄每個微孔的 OD值。

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