100ul SYBR Green I(10000×)電泳用
參考價(jià) | ¥ 420 |
訂貨量 | ≥1 |
- 公司名稱 武漢百浩天生物科技有限公司
- 品牌
- 型號(hào) 100ul
- 產(chǎn)地 湖北武漢
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
- 更新時(shí)間 2016/10/24 10:15:48
- 訪問(wèn)次數(shù) 274
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SYBR Green I(10000×)電泳用
SYBR Green I是高靈敏的DNA熒光染料,適用于各種電泳分析,操作簡(jiǎn)單:無(wú)須脫色或沖洗。至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。SYBR Green I 與dsDNA結(jié)合熒光信號(hào)會(huì)增強(qiáng)800-1000倍,用SYBR Green I染色的凝膠樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低??蛇m用于多種電泳分析。
SYBR Green I適合于多種凝膠電泳方法:瓊脂糖凝膠,聚丙烯酰胺凝膠電泳,脈沖電場(chǎng)凝膠電泳,和毛細(xì)管電泳等。
SYBR Green I與雙鏈DNA的親和力非常高,因此可以用做電泳前染色,對(duì)分子生物學(xué)中常用的酶(如:Taq酶、逆轉(zhuǎn)錄酶、內(nèi)切酶、T4連接酶等)沒(méi)有抑制作用。另外,SYBR Green I與EB相比,誘變能力大大降低。
SYBR Green I核酸染料特點(diǎn)
高靈敏:至少可檢出20pg DNA,高于EB染色法25-100倍。
信噪比高:樣品熒光信號(hào)強(qiáng),背景信號(hào)低。
操作簡(jiǎn)單:無(wú)須脫色或沖洗。
適用范圍廣:可適用于多種電泳分析。
使用方便:不影響其它修飾酶作用。
安全性高:分子克隆上明確誘變能力很低
使用方法
SYBR Green I預(yù)染方法
- 該方法適于瓊脂糖凝膠電泳和PAGE凝膠電泳
- 工作液的配制:用電泳緩沖液將10000×的SYBR GreenⅠ稀釋100倍,即為SYBR GreenⅠ工作液。SYBR GreenⅠ工作液可以置2-8℃冷藏一個(gè)月以上。
- 制膠:按常規(guī)方法制膠,不含任何染料。
- 樣品染色:向分析樣品中加入SYBR GreenⅠ工作液和載樣緩沖液,室溫放置10分鐘,使SYBR GreenⅠ與樣品中DNA充分結(jié)合。SYBR GreenⅠ工作液加入量為總上樣量的1/10。
- DNA Marker染色:將5μL DNA Marker和1μLSYBR GreenⅠ工作液混勻,室溫放置5分鐘,使SYBR GreenⅠ與DNA充分結(jié)合。(商品Marker稀釋2-5倍后再電泳,否則電泳條帶會(huì)變形,特別是大片段。)
- 上樣、電泳:按常規(guī)操作。
SYBR Green I后染方法
- 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
- 用PH=7.0-8.5的緩沖液(如:TAE,TBE或TE),按照10000:1的比例稀釋SYBR GreenⅠ濃縮液,混勻,制成染色溶液。
- 將染色溶液倒入合適的聚丙烯容器中,放入凝膠,用鋁箔等蓋住容器使染料避光。室溫振蕩染色10-30分鐘,染色時(shí)間因凝膠濃度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝膠直接在玻璃平皿上染色,將配好的工作溶液輕輕地倒在膠板上,讓工作液均勻地覆蓋整個(gè)膠板,并染色30分鐘。玻璃平皿必須預(yù)先經(jīng)過(guò)硅烷化溶液處理(避免染料吸附在玻璃表面上)。
- 用紫外儀觀測(cè)。
SYBR Green I使用注意事項(xiàng)
- 在"SYBR GreenⅠ預(yù)染色方法"中,電泳時(shí)間不要超過(guò)2小時(shí),否則SYBR GreenⅠ會(huì)從DNA上分離出來(lái),會(huì)產(chǎn)生彌散狀條帶。
- 在常規(guī)用酒精沉淀核酸的過(guò)程中,SYBR Green I可以全部從雙鏈核酸上去掉。
- 如果想對(duì)用 SYBR Green I 染過(guò)的膠進(jìn)行Southern blots,建議在預(yù)雜化和雜化溶液中加入0.1%- 0.3%的SDS。
- 在紫外照射透視下,與雙鏈DNA接合的SYBR Green I呈現(xiàn)綠色熒光。如果膠中含有單鏈DNA則顏色為橘黃而不是綠色。
- SYBR Green對(duì)玻璃和非聚丙烯材料具有一定親合力。建議在稀釋、貯存、染色等使用過(guò)程中用聚丙烯類容器。
D0120 | 5×TBE 緩沖液 | 500ml | 120 |
D0121 | 50×TAE 緩沖液 | 500ml | 160 |
D0125 | GoldView核酸染色劑(EB替代品) | 1ml/100ml | 80/4000 |
D0128 | SYBR Green I(10000×)電泳用 | 100ul | 420 |
D0131 | 40%丙烯酰胺/甲叉溶液(19:1) | 100ml/500ml | 80/280 |
D0132 | 6×DNA loading buffer | 5ml | 42 |
D0133 | SYBR Green I(20×)定量PCR用 | 1ml | 120 |
D0135 | 鮭魚(yú)精DNA(10mg/ml) | 1ml | 88 |
D0136 | 50×Denhardt溶液 | 100ml | 120 |
D0138 | 20×SSC(PH=7.0) | 100ml/500ml | 60/200 |
D0140 | TE緩沖液(PH=8.0) | 100ml/500ml | 60/120 |
D0147 | 核酸助沉劑(Acryl Carrier) | 1ml | 100 |
D0196 | X-gal溶液(20mg/ml) | 1ml | 40 |
D0198 | IPTG 溶液 (200mg/ml) | 1ml/5ml | 60/160 |
D0199 | 氨芐青霉素溶液(100mg/ml) | 10ml | 100 |
D0201 | 100×TE緩沖液(PH=8.0) | 100ml/500ml | 120/300 |
D0210 | LB培養(yǎng)基 | 10L | 260 |
N0130 | RNAse A溶液(10mg/ml) | 1ml | 62 |
P0450 | 剝離硅烷/疏水硅烷(Repel—Silane)(20×) | 10ml | 160 |
P0460 | 親和硅烷bind-silane | 100ml | 280 |
R0004 | 非凍型組織細(xì)胞RNA保存液(RNAwait) | 10ml/100ml | 60/320 |
R0008 | 非凍型血液RNA保存液(Blood RNAwait) | 10ml/100ml | 100/520 |
R0020 | 10×MOPS 緩沖液 | 500ml | 240 |
R0021 | 6×RNA loading buffer | 1ml | 40 |
R0025 | DEPC處理水(無(wú)DNase無(wú)RNase水) | 100ml/500ml | 60/180 |
R0026 | 4×甲醛變性膠上樣緩沖液 | 1ml | 80 |
R0028 | SYBR Green II(10000×) | 100ul | 460 |
D0215 | 線粒體DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 1280/2360 |
D0218 | 植物線粒體DNA提取試劑盒 | 50T/100T | 1380/2560 |