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異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

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試劑,耗材

IPTG(Isopropyl β-D-Thiogalactopyranoside )

CAS#:367-93-1

異丙基-β-D-硫代半乳糖苷

說明:IPTG為安慰性誘導(dǎo)物,X-gal為生色底物,二者共同用于藍(lán)白斑篩選。IPTG可誘導(dǎo)載體lac操縱子DNA區(qū)段合成β-半乳糖苷酶氨基端片段,該片段可與宿主細(xì)胞編碼的缺陷型β-半乳糖苷酶實(shí)現(xiàn)基因內(nèi)互補(bǔ)(α互補(bǔ))。實(shí)現(xiàn)α互補(bǔ)的細(xì)菌暴露IPTG,鋪在含有X-gal生色底物的培養(yǎng)基上,可形成藍(lán)色菌落。外源DNA插入質(zhì)粒的多克隆位點(diǎn)后可破壞α互

補(bǔ)作用,將產(chǎn)生白色菌落。

別名:Isopropyl-β-D-Thiogalactoside

分子式:C9H18O5S 分子量:238.31

用途:用 途:IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導(dǎo)物質(zhì)。基于這個(gè)特性,當(dāng)pUC系列的載體DNA(或其他帶有lacZ 基因載體DNA)以lacZ 缺失細(xì)胞為宿主進(jìn)行轉(zhuǎn)化時(shí)、或用M13噬菌體的載體DNA進(jìn)行轉(zhuǎn)染時(shí),如果在平板培養(yǎng)基中加入XgalIPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互補(bǔ)性,可以根據(jù)是否呈現(xiàn)白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑選出基因重組體。此外,它還可以作為具有lactac等啟動(dòng)子的表達(dá)載體的表達(dá)誘導(dǎo)物使用。

外觀:白色結(jié)晶性粉末

特性:純度 :≥99.0% (TLC) 熔點(diǎn):110-114

濕度(%):≤1.0 pH (5%, )25℃:5-7

比旋光度 (1%, )-34.0--29.0

溶解性:IPTG貯存液,先在8ml蒸餾水中溶解2g,定溶至

補(bǔ)充使用說明首先把IPTG配制成23.83 mg/ml100 mM)的水溶液,并進(jìn)行過濾除菌后保存。然后在100 ml的瓊脂培養(yǎng)基中,加入100 μl的上述溶液、200 μlX-Gal20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液)和100 μlAmp100 mg/ml),制作成IPTGX-Gal、Amp平板培養(yǎng)基。當(dāng)DNA段插入至pUC系列載體(或其他帶有lacZ、Amp基因載體),然后轉(zhuǎn)化至lacZ缺失細(xì)胞中后,涂布上述的IPTGXGal、Amp平板培養(yǎng)基,可根據(jù)長出菌體的藍(lán)白色,而方便地挑選出基因重組體(白色為具有DNA插入片段的基因重組體)

10ml,用0.22um濾器過濾除菌,貯存于-20℃。

S22-24/25

保存溫度: 2-8

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