ELISA板包被原理:如何使抗原或抗體固定在96孔板上?
ELISA實(shí)驗(yàn)中,板包被是將抗原或抗體結(jié)合到固相載體表面上的關(guān)鍵步驟。這一過(guò)程主要依賴于抗原抗體之間的特異性結(jié)合以及蛋白質(zhì)與固體載體之間的物理吸附。物理吸附包括靜電作用、疏水作用、氫鍵和范德華力等。在適當(dāng)?shù)膒H環(huán)境下,蛋白質(zhì)表面電荷與微孔板表面電荷發(fā)生靜電吸附,而疏水作用則使蛋白質(zhì)自發(fā)吸附在載體表面。此外,大分子蛋白質(zhì)因其含有更多的疏水基團(tuán)而更易吸附。包被過(guò)程中,未吸附的抗原或抗體通過(guò)洗滌去除,確保后續(xù)反應(yīng)的準(zhǔn)確性。包被的濃度、溫度和時(shí)間等因素需根據(jù)實(shí)驗(yàn)特點(diǎn)和材料性質(zhì)選定,以獲得最佳的靈敏度和特異性。
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