資料簡介
羅氏(Roche)熒光定量PCR儀是一類基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)(qPCR)的儀器,用于核酸(DNA/RNA)的精準(zhǔn)定量、基因表達(dá)分析、病原體檢測等。羅氏旗下的主要型號(hào)包括經(jīng)典的LightCycler®系列(如LC480、LC96)和cobas® z 480(專為臨床診斷優(yōu)化)。以下是關(guān)鍵信息:
一、核心技術(shù)原理
實(shí)時(shí)熒光檢測
通過熒光染料(如SYBR Green)或探針(如TaqMan、HybProbe)標(biāo)記擴(kuò)增產(chǎn)物,每輪PCR循環(huán)實(shí)時(shí)采集熒光信號(hào),定量初始模板量。
動(dòng)態(tài)范圍廣
可檢測從單拷貝到10^9拷貝的核酸分子,靈敏度高。
熔解曲線分析
區(qū)分特異性擴(kuò)增與非特異性產(chǎn)物(如引物二聚體),驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)特異性。
二、羅氏主要機(jī)型及特點(diǎn)
1. LightCycler® 480(LC480)
通量:96孔或384孔板(需選配對應(yīng)模塊)。
檢測通道:6色熒光(FAM, HEX, ROX, Red 640, Cy5等),支持多重PCR。
應(yīng)用:科研(基因表達(dá)、SNP分型、HRM)、病毒載量檢測等。
2. LightCycler® 96
簡化版LC480:96孔固定模塊,性價(jià)比高,適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室。
兼容性:支持羅氏預(yù)混試劑(如FastStart Essential DNA Probes Master)。
3. cobas® z 480
臨床診斷專用:自動(dòng)化程度高,配套FDA/CE認(rèn)證試劑(如HPV、HIV、HCV檢測)。
合規(guī)性:符合GLP/GMP標(biāo)準(zhǔn),適合醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室。
三、優(yōu)勢與競品對比
特性 | 羅氏LightCycler® | 其他品牌(如ABI 7500) |
---|---|---|
溫控速度 | 快(4.8°C/秒) | 中等(~3°C/秒) |
多色檢測 | 最多6通道 | 通常5通道(如ABI QuantStudio) |
臨床適配性 | cobas®系列整合診斷流程 | 需額外驗(yàn)證(如Bio-Rad CFX) |
四、典型應(yīng)用場景
科研領(lǐng)域:基因差異表達(dá)、microRNA分析、CRISPR編輯驗(yàn)證。
醫(yī)學(xué)診斷:傳染病、腫瘤基因突變篩查。
農(nóng)業(yè)/食品安全:轉(zhuǎn)基因成分檢測、食源性病原體監(jiān)控。
五、注意事項(xiàng)
試劑配套:推薦使用羅氏原廠Master Mix(如FastStart系列),但部分第三方試劑也可兼容。
軟件分析:需配合LightCycler® Software(提供絕對定量、相對定量、熔解曲線分析模塊)。
如果需要特定型號(hào)的詳細(xì)參數(shù)或應(yīng)用方案,可進(jìn)一步說明需求!
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