資料簡(jiǎn)介
以下是兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明綜合整理:
BS-4207 兔子白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
一、實(shí)驗(yàn)原理
采用雙抗體夾心法:包被抗IL-1β抗體的微孔板捕獲樣本中的IL-1β,再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合形成復(fù)合物,TMB顯色后通過(guò)OD值定量分析。
二、試劑盒組成
標(biāo)準(zhǔn)品?:通常為凍干粉(如2700ng/L),需用稀釋液復(fù)溶
酶標(biāo)試劑?:HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體(3ml/6ml)
洗滌緩沖液?:50×濃縮液,需蒸餾水稀釋
底物(TMB)?和?終止液?各12ml
封板膜?、?密封袋?及說(shuō)明書(shū)
三、樣本處理要求
血清/血漿?:
避免溶血,離心條件:2000-3000rpm×10-30分鐘
短期保存于2-8℃,長(zhǎng)期需-20℃以下分裝,避免反復(fù)凍融
組織勻漿?:
按重量加入PBS勻漿,離心取上清
細(xì)胞上清?:
離心去除碎片后分裝凍存
注意事項(xiàng)?:
避免使用含NaN3的樣本(抑制HRP活性)
四、操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:梯度稀釋至7個(gè)濃度,第8孔為空白對(duì)照
加樣?:
標(biāo)準(zhǔn)品/樣本各加50-100μl,37℃孵育1-2小時(shí)
洗滌?:
使用稀釋后的洗滌液,洗板4-6次,拍干
顯色?:
加TMB避光反應(yīng)15-30分鐘,終止后15分鐘內(nèi)測(cè)OD450nm
五、注意事項(xiàng)
試劑使用前需平衡至室溫,避免泡沫產(chǎn)生
不同批號(hào)試劑不可混用,底物需避光保存
顯色后若OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍,需稀釋樣本復(fù)測(cè)
六、數(shù)據(jù)計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)、OD值為縱坐標(biāo)繪制曲線,通過(guò)回歸方程計(jì)算樣本濃度。
注:以上資料僅供參考,如需具體品牌試劑盒的完整說(shuō)明書(shū),可參考對(duì)應(yīng)廠商提供的文檔。
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