巴氏染色流程
1. 標(biāo)本充分固定30min以上;
2. 流水中漂洗數(shù)次,洗去玻片上殘留酒精;
3. 蘇木素染色8~10min;
4. 自來水漂洗1min;
5. 1%鹽酸-乙醇浸3~5次,變?yōu)樘壹t色;
6. 流水沖洗3 min;
7. *1~2min;
8. 溫水2~3min;
9. 80%酒精1min;
10. 95%酒精1min;
11. 橘黃G 30s;
12. 95%酒精1min;
13. 95%酒精1min;
14. EA50 7 min;
15. 95%酒精1min;
16. 95%酒精1min;
17. 95%酒精1min;
18. *1min
19. *1min
20. *1min
21. *1min;
22. 封片。
注:
1. 因蘇木素上有結(jié)晶下有沉淀,使用前應(yīng)用濾紙過濾一遍。染色時要輕拿輕放。蘇木素染液在染夠1500~2000張玻片的情況下更換新的染液。蘇木素的染色時間隨氣溫和染料情況而酌情改變。
2. 鹽酸分化的作用為分化掉胞漿上沾上的蘇木素,因此時間不宜長。但如果分化不夠,會造成細(xì)胞核顏色過深或(及)胞漿很難上色。.分化后立即放入自來水中沖洗。不宜久置,否則可使全部顏色消失。
3. 堿化亦稱返藍(lán)過程,返藍(lán)偏短,蘇木色精形成不充分,從而影響染色效果。*每缸過500張玻片更新;溫水更換德頻率當(dāng)更高。
4. 橘黃染色時間不宜過長,否則EA50不易上色。橘黃每缸過500張玻片更新。
5. EA50使用前要充分?jǐn)嚢?,染色過程中提拿、旋轉(zhuǎn)染色架數(shù)詞。每缸過500~800張玻片后更新。
6. 技術(shù)人員操作要流暢,動作干凈利落,不可把上一缸德染色液帶入下一缸,每缸交替時要甩干玻片上殘存德液體。
橘黃液之前的*缸酒精每過6架更新一瓶;橘黃液之后的*缸每過6架更新一瓶;每過6架之后更新*缸*,并順次向前。
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