一、目的要求
　　1. 學(xué)會使用內(nèi)標法定量測定；
　　2. 學(xué)會熟練使用FID。
　　3. 學(xué)會測定峰高校正因子。
二、方法原理
    DNP柱是中等極性的色譜，在一定的色譜操作條件下可對一些簡單的苯系化合物進行*的分離。
三、儀器與試劑
　　1.儀器：成都科捷分析儀器公司生產(chǎn)的GC-5890氣相色譜儀、氣體發(fā)生器、實驗三制備的色譜柱、FID、微量注射器 、2支1ml通用注射器、5ml容量瓶
　　2.試劑：苯、甲苯（以上均為分析純）。丙酮洗針液
四、實驗步驟
　　1．配制標準溶液  稱一干燥潔凈的5ml容量瓶質(zhì)量，（稱準至0.001g），用醫(yī)用注射器吸取1ml甲苯注入容量瓶內(nèi)，稱重，計算出甲苯質(zhì)量，再用另一支注射器取0.2ml苯注入容量瓶，再稱重，求出瓶中苯的質(zhì)量（稱準至0.001g），搖勻備用。
　　2. 配制甲苯試樣溶液  另取一干燥潔凈的試劑瓶，先稱出瓶的質(zhì)量，然后用注射器吸取1ml甲苯試樣，注入瓶中，稱出（瓶和甲苯）質(zhì)量，再求出甲苯試樣質(zhì)量。再用另一支注射器取0.1ml苯（內(nèi)標物）注入容量瓶，再稱重，求出瓶中苯的質(zhì)量（稱準至0.001g），搖勻備用。
　　3. 色譜儀的開機和調(diào)試
　?。?）打開氣體發(fā)生器，流速為30ml/min，十分鐘后排水。
　　（2）將載氣通入主機氣路，檢漏，調(diào)節(jié)載氣流速為30ml/min，通載氣半個小時將氣路中的空氣等趕走。
　?。?）打開色譜主機電源，在控制面板上對氣化室、柱箱進行控溫，將溫度分別調(diào)節(jié)為120℃，90℃℃；
　　（4）打開色譜數(shù)據(jù)處理機，輸入測量參數(shù)。
　?。?）FID的點火
　　打開空氣開關(guān)，調(diào)節(jié)流量為500～600ml/min，設(shè)置檢測器溫度為110℃；待檢測器溫度恒定至110℃，打開氫氣開關(guān)，將流量調(diào)節(jié)至80ml/min左右，點火，點燃后將氫氣流量降至20－30ml/min。
　　4.標準溶液和未知試樣的分析測定
　　（1）觀察儀器譜圖基線是否平直，待儀器電路和氣路系統(tǒng)達到平衡，基線平直后，用1微升清洗過的微量注射器吸取標準試樣0.2－0.4微升進樣，分析測定，色譜圖走完后記錄樣品名對應(yīng)的文件名，打印出色譜圖及分析測試結(jié)果。重復(fù)操作三次。記錄分析結(jié)果。
　?。?）試樣的分析  用1微升清洗過的微量注射器吸取甲苯試樣溶液0.2－0.4微升進樣，分析測定，色譜圖走完后記錄樣品名對應(yīng)的文件名，打印出色譜圖及分析測試結(jié)果。按上述方法再進樣分析測定兩次，記錄分析結(jié)果。
　　5.結(jié)束工作
　　 （1）實驗完成后，清洗進樣器。
　　（2）關(guān)機。先關(guān)氫氣閥，再關(guān)空氣閥，降低柱溫，關(guān)色譜工作站，待柱溫降至50℃再停止通載氣。
　?。?）清理實驗臺面，填寫儀器使用記錄。
五、結(jié)果處理
　　1. 記錄實驗操作條件。
　　2. 將打印出的色譜分析結(jié)果上將測量的各組分的峰高填入下表。

3．根據(jù)標準溶液分析測定所得到的數(shù)據(jù)，按下式計算出甲苯的峰高校正因子（以苯為標準物）：

4．根據(jù)甲苯試樣溶液分析測定所得到的數(shù)據(jù)，按下式計算出樣品中甲苯的含量（以苯為內(nèi)標物）：

式中，ms、m樣分別代表內(nèi)標物苯及樣品溶液的質(zhì)量；f’甲苯（h）為苯做標準物的甲苯的峰高相對質(zhì)量校正因子。

六、注意事項

1.微量注射器使用前應(yīng)先用丙酮抽洗5～6次，然后再用所要吸取的試液抽洗5～6次。

2. 氫氣是一種危險氣體，使用過程中一定要按要求操作，而且色譜實驗室一定要有良好的通風(fēng)設(shè)備。

七、思考題

1. 內(nèi)標法定量有哪些優(yōu)點？方法的關(guān)鍵是什么？

2. 本實驗為什么可以采用峰高定量？