掃描電子顯微鏡樣品制備方法與技巧

來源：杭州科賦機(jī)電設(shè)備有限公司 2025年06月16日 13:29

　　掃描電子顯微鏡樣品制備需根據(jù)樣品類型(如塊狀、粉末、生物樣品等)采用不同方法，并遵循干燥、無油、導(dǎo)電的基本要求，以下是一些具體的方法與技巧：

　　一、樣品基本要求

　　干燥：樣品必須充分干燥，因?yàn)樗魵鈺?huì)加速電子槍陰極材料的揮發(fā)，降低燈絲壽命，同時(shí)散射電子束，增加能量分散，降低分辨能力。

　　無油：樣品表面不能含有有機(jī)油脂類污染物，這些污染物在電子束作用下容易分解成碳?xì)浠?，對真空環(huán)境造成污染，降低成像質(zhì)量。

　　導(dǎo)電性好：樣品必須具有良好的導(dǎo)電性，否則在電子束反復(fù)掃描下，樣品表面電位會(huì)升高，導(dǎo)致充電效應(yīng)，使圖像畸變。對于不導(dǎo)電或?qū)щ娦阅懿畹臉悠?，需要噴鍍一層?dǎo)電膜。

　　二、樣品制備方法

　　塊狀樣品

　　對于小塊或低分辨率樣品，可以直接固定在碳導(dǎo)電膠帶上。

　　對于塊體較大或需要高分辨觀測的樣品，可以采用碳/銀導(dǎo)電漿液進(jìn)行固定，或在碳導(dǎo)電膠帶固定后再在其四周刷上碳膠或銀膠，以增強(qiáng)導(dǎo)電與固定作用。

　　塊狀樣品推薦冷凍脆斷或離子束拋光以保持截面平整，便于觀察。

　　粉末樣品

　　常規(guī)粉體可以直接利用牙簽挑起后，彈在導(dǎo)電膠帶上，然后用洗耳球或壓縮空氣等吹掉浮粉。

　　較大粉體與不導(dǎo)電粉體、磁性粉體，可以將液態(tài)的碳膠或銀膠刷在樣品臺(tái)上，在未干之前利用牙簽挑起粉體彈在其上，然后用洗耳球或壓縮空氣等吹掉浮粉。

　　小顆粒粉體、易團(tuán)聚粉體或需要進(jìn)行顆粒度統(tǒng)計(jì)的粉體，需要先利用其稀釋溶液對粉體進(jìn)行稀釋超聲分散后才可進(jìn)行觀測。

　　生物樣品

　　微生物樣品含水量大，質(zhì)地軟，干燥脫水易變形，因此需要進(jìn)行相應(yīng)的前處理。通常包括取樣、固定、沖洗、脫水、置換、干燥、粘樣、噴金等步驟。

　　對于動(dòng)植物組織樣本，需要注意避免機(jī)械損傷，取材后立即投入電鏡固定液內(nèi)室溫固定，再轉(zhuǎn)移至低溫保存。

　　三、掃描電子顯微鏡樣品制備技巧

　　清洗：樣品表面常常附著灰塵、硅酸鹽或油污等污染物，需要在不破壞樣品表面構(gòu)造的前提下進(jìn)行清洗。

　　粘樣：使用導(dǎo)電膠帶或銀膠將樣品固定在樣品臺(tái)上時(shí)，要確保導(dǎo)電通路良好，避免接觸電阻過大。

　　鍍膜：對于不導(dǎo)電或?qū)щ娦阅懿畹臉悠?，需要噴鍍一層?dǎo)電膜。鍍膜材料可以選擇金、鉑、碳等，鍍膜厚度要適中，過厚會(huì)掩蓋樣品細(xì)節(jié)。

　　尺寸控制：樣品尺寸應(yīng)盡量小，以減少抽真空時(shí)間并避免污染。多孔材料需預(yù)先烘干或低溫加熱。

　　避免污染：在制備過程中要避免樣品受到污染，特別是粉末樣品要避免相互污染。

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