在利用大腸桿菌進行蛋白制備的實驗或生產(chǎn)過程中,大腸桿菌的裂解是獲取蛋白質(zhì)的關鍵步驟。
大腸桿菌原核表達蛋白時,如果用超聲儀超聲破菌,會遇到兩個問題:1.超聲功率太大或時間太長,目的蛋白被破壞掉,跑電泳會看不到目的條帶。2.超聲功率不夠或超聲時間不夠,導致獲得的目的蛋白量很少。
賽爾瑞成的兩款大腸桿菌破菌液就很好的解決了這個問題,有很多老師反饋,破菌率比超聲儀破菌要高。賽爾瑞成大腸桿菌破菌液讓大腸桿菌原核表達更簡單、高效!
一、大腸桿菌專用破菌液(貨號:PR0202)
產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 節(jié)省成本 只需將菌體與破菌液簡單混勻,然后凍融即可,不需要超聲儀就能使菌體破碎,釋放可溶上清。節(jié)省儀器成本和人力成本。(注意:1.一定要混勻,2.一定要凍結(jié)實)
2. 組成成分溫和 不含還原劑、強變性劑、離子型去污劑等烈性成分,對絕大多數(shù)蛋白結(jié)構和活性無影響。
二、 裂析超級破菌液(貨號:PR0502)
產(chǎn)品優(yōu)勢
1. 高效溫和:無需超聲、凍融或溶菌酶,高效裂解同時保護目標分子活性。
2. 操作極簡:只需混勻和離心(具體操作見下圖),無需復雜設備或優(yōu)化參數(shù),節(jié)省時間和成本。
特性 | 傳統(tǒng)超聲/均質(zhì)破菌 | 傳統(tǒng)凍融破菌 | 溶菌酶破菌 | 賽多培®大腸桿菌專用破菌液 | 裂析TM超級破菌液 |
操作簡便性 | 依賴昂貴設備(超聲儀、均質(zhì)機)操作復雜,參數(shù)優(yōu)化耗時 | 需反復凍融,耗時較長 | 無需設備,溶菌酶可能殘留在產(chǎn)物中,需額外純化步驟,否則可能干擾后續(xù)實驗(如質(zhì)譜分析或酶活性測定)。 | 無需設備,直接凍融離心,操作簡便 | 無需設備,無需凍融離心,操作極簡 |
蛋白質(zhì)保護 | 高溫和剪切力易導致蛋白質(zhì)變性 | 反復凍融可能導致蛋白質(zhì)失活 | 能有效保持目標蛋白的天然活性。 | 成分溫和,最大限度保護蛋白質(zhì)活性 | 成分溫和,最大限度保護蛋白質(zhì)活性 |
破菌效率 | 高效,但需優(yōu)化參數(shù) | 效率較低,適合脆弱細胞 | 高濃度菌體或存在抑制劑(如培養(yǎng)基成分)可能降低效率。 | 高效裂解,適用于多種大腸桿菌菌株 | 高效裂解,適用于多種大腸桿菌菌株 |
適用場景 | 適合大規(guī)模樣品處理 | 適合小規(guī)模實驗 | 適合小規(guī)模實驗 | 適合小規(guī)模實驗 | 適合小規(guī)模實驗和大規(guī)模處理,靈活性強 |
成本 | 設備成本高,維護費用高 | 成本較低,但效率也低 | 大規(guī)模生產(chǎn)時,酶的使用成本顯著上升。 | 成本低,性價比高 | 成本較低,性價比高 |
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