干細(xì)胞培養(yǎng)基是干細(xì)胞體外培養(yǎng)的核心要素,其配方設(shè)計(jì)直接影響干細(xì)胞的生長、增殖、分化及功能維持。
干細(xì)胞培養(yǎng)基的核心成分:
基礎(chǔ)培養(yǎng)基
常用類型:DMEM/F12、α-MEM、RPMI-1640等,提供氨基酸、維生素、無機(jī)鹽等基礎(chǔ)營養(yǎng)。
特點(diǎn):DMEM/F12因兼顧高糖與低糖需求,適用于多種干細(xì)胞類型。
血清及替代物
胎牛血清(FBS):傳統(tǒng)培養(yǎng)基中添加10%-20%,提供生長因子、激素等,但存在批次差異和污染風(fēng)險(xiǎn)。
無血清替代物:如人血小板裂解物(hPL)、化學(xué)成分限定培養(yǎng)基(CDM),減少異源蛋白干擾,提高實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。
生長因子與細(xì)胞因子
關(guān)鍵因子:bFGF(促進(jìn)增殖)、EGF(維持干性)、TGF-β(調(diào)控分化)、LIF(維持多能性)。
作用:通過信號通路調(diào)控干細(xì)胞命運(yùn),例如bFGF激活MAPK/ERK通路促進(jìn)增殖。
其他添加劑
緩沖體系:碳酸氫鈉(維持pH 7.4)、HEPES(增強(qiáng)pH穩(wěn)定性)。
谷氨酰胺:提供能量,但需-20℃保存以防止降解。
抗生素:如青霉素-鏈霉素,防止細(xì)菌污染,但長期使用可能誘導(dǎo)耐藥性。
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