FITC標(biāo)記親和純化山羊抗小鼠IgG(H+L)二抗-檢測組織細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)熒光探針
FITC(Fluorescein Isothiocyanate,異硫氰酸熒光素)純品為黃色或橙黃色結(jié)晶粉末,易溶于水和酒精溶劑。FITC分子量為389。4,最大吸收光波長為 490~495nm,最大發(fā)射光波長為520~530nm,呈現(xiàn)明亮的黃綠色熒光。FITC在冷暗干燥處可保存多年,是目前應(yīng)用廣泛的熒光素。由于 FITC是小分子化合物,每一個(gè)抗體可標(biāo)記幾個(gè)FITC分子,IgM通常用小分子的熒光素標(biāo)記,如FITC、Cy3/5、Texas Red等。然而FITC的最大缺點(diǎn)是淬滅快,因此要和抗淬滅劑一起使用。FITC性質(zhì)穩(wěn)定,能與蛋白質(zhì)結(jié)合,是檢測組織細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)常用的熒光探針。它還能標(biāo)記抗體,可用于免疫組織化學(xué)單染或多重染色。FITC熒光二抗主要優(yōu)點(diǎn)是人眼對(duì)黃綠色較為敏感,通常切片標(biāo)本中的綠色熒光少于紅色。缺點(diǎn)是在光照下 易淬滅,易受自發(fā)熒光影響。
艾美捷FITC標(biāo)記親和純化山羊抗小鼠IgG(H+L)二抗:
貨號(hào):115-095-003
靶標(biāo):小鼠
宿主:山羊
抗體形式:全IgG
特異性:IgG(H+L)
偶聯(lián)物:熒光素(FITC)
產(chǎn)品類別:全IgG親和純化抗體
克隆性:多克隆
物理狀態(tài):凍干固體
儲(chǔ)存與復(fù)溶:凍干固體應(yīng)于2-8°C下保存。使用標(biāo)示體積的去離子水復(fù)溶,如有渾濁可離心澄清。使用當(dāng)天制備工作濃度。產(chǎn)品在2-8°C下作為未稀釋液體可穩(wěn)定保存約6周。
復(fù)溶后的長期儲(chǔ)存:分裝后于-70°C或更低溫度下冷凍保存。避免反復(fù)凍融。或者,加入等體積的甘油(ACS級(jí)或更優(yōu)),使最終濃度達(dá)到50%,并以液體形式在-20°C下保存。
有效期:自復(fù)溶之日起一年。如果測試結(jié)果符合預(yù)期用途,有效期可以延長。
純度:抗體通過免疫親和色譜法從抗血清中純化,使用與瓊脂糖珠偶聯(lián)的抗原進(jìn)行純化。
緩沖液:0.01M磷酸鈉、0.25M氯化鈉,pH 7.6
穩(wěn)定劑:15 mg/ml牛血清白蛋白(無IgG、無蛋白酶)
防腐劑:0.05%疊d化鈉
建議的工作濃度或稀釋范圍:大多數(shù)應(yīng)用為1:50 - 1:200
稀釋因子以范圍形式給出,因?yàn)樽罴严♂尪仁嵌喾N因素的函數(shù),例如抗原密度、通透性等。實(shí)際使用的稀釋度必須通過實(shí)驗(yàn)確定。
熒光素(FITC)
最大吸收波長(Amax):492 nm
最大發(fā)射波長(Emax):520 nm
FITC(異硫氰酸熒光素)是我們用于抗體和純化蛋白偶聯(lián)的熒光素形式,鏈霉親和素除外。熒光素偶聯(lián)物在492 nm處吸收光強(qiáng),在520 nm處熒光強(qiáng)。盡管其亮度不如其他綠色熒光染料,但由于其歷史悠久,FITC仍然是廣泛使用的熒光團(tuán)之一。熒光素的主要缺點(diǎn)是其快速光漂白(褪色),可以通過在封片介質(zhì)中使用抗褪色劑來緩解。對(duì)于許多涉及FITC的應(yīng)用,Alexa Fluor 488是一個(gè)更好的選擇,因?yàn)樗燎腋凸狻?/span>
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