細(xì)胞分選
根據(jù)細(xì)胞所具有的特性把某種特定的細(xì)胞亞群從混合的細(xì)胞樣品中分離出來的一種技術(shù),它是對某一特定細(xì)胞進(jìn)行生化分析和功能分析的前提和基礎(chǔ)。
表1. 常見細(xì)胞分選技術(shù)(磁性分選、流式分選)對比
常見細(xì)胞分選技術(shù) | 分選結(jié)果 | 安全性 | 其他 |
細(xì)胞磁性分選技術(shù) | 1、適宜進(jìn)行單Marker分選 2、分選純度好,得率高 3、分選對細(xì)胞無損,尤其適用于免疫細(xì)胞分選 | 1、陰選試劑盒(需要的細(xì)胞標(biāo)記)。 2、陽選納米級磁珠安全、可靠,生物可降解基質(zhì),無需額外去除。
| 1、不需要昂貴的設(shè)備、操作簡單。 2、陰選試劑盒無需分選柱,陽選納米磁珠所需磁珠用量少。
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流式細(xì)胞分選技術(shù)
| 1、多Marker分選,純度高,得率好 2、傳統(tǒng)流式分選:高壓高速對細(xì)胞沖擊較大,細(xì)胞受損嚴(yán)重
| 1、容易交叉污染 2、帶熒光抗體使用存在爭論 | 1、設(shè)備昂貴、操作難度較大,需要專門操作人員進(jìn)行操作和數(shù)據(jù)分析 |
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由上表可知,細(xì)胞磁性分選技術(shù)由于其簡單快捷的操作,分選細(xì)胞純度好、得率高、活性好等特點(diǎn),已成為目前使用廣泛的細(xì)胞分選技術(shù)。
目前細(xì)胞磁性分選可以分為陰性分選和陽性分選兩種方式。陰性分選一般搭配無柱分離(陰選抗體加磁珠兩步標(biāo)記),陽性細(xì)胞分選一般搭配有柱分離(陽選抗體磁珠一步標(biāo)記)。
表2. 陰性分選(無柱分離)、陽性分選(有柱分離)對比
磁性分選技術(shù) | 陰性分選(無柱分離) | 陽性分選(有柱分離) |
磁珠粒徑 | 粒徑250 nm~4.5 μm的磁珠 | 粒徑<100 nm的磁珠 |
磁珠標(biāo)記細(xì)胞 | 生物素標(biāo)記抗體Cocktail(所有不需要細(xì)胞的表面標(biāo)識抗體)加入細(xì)胞懸液中孵育,鏈霉親和素磁珠再加入細(xì)胞懸液孵育,磁珠標(biāo)記所有不需要的細(xì)胞。 | 陽性抗體磁珠(帶一種需要細(xì)胞表面標(biāo)識抗體的磁珠)加入細(xì)胞懸液孵育,磁珠標(biāo)記需要的細(xì)胞。 |
細(xì)胞分選 | 磁珠標(biāo)記細(xì)胞的試管入磁鐵,并孵育,倒出非標(biāo)記細(xì)胞,即為所需細(xì)胞。 | 分離柱進(jìn)磁鐵,加入磁珠標(biāo)記細(xì)胞,加緩沖液洗出非標(biāo)記細(xì)胞,分離柱取出磁鐵,用活塞推出磁珠標(biāo)記細(xì)胞。 |
優(yōu)點(diǎn) | 需要的細(xì)胞未經(jīng)標(biāo)記。 | 分選細(xì)胞純度高、特異性高, 所需磁珠用量少。 |
缺點(diǎn) | 需要知道所有不需要細(xì)胞的表面標(biāo)識抗體, 磁珠用量多,特異性稍差。 | 可能會對細(xì)胞產(chǎn)生一定的激活作用 |
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陰性分選(無柱分離)流程示意圖:
陽性分選(有柱分離)流程示意圖:
翌圣生物擁有高性能單克隆抗體研發(fā)平臺,憑借其豐富的抗體和磁珠等開發(fā)經(jīng)驗(yàn),全力開發(fā)推出細(xì)胞分選產(chǎn)品,提供高質(zhì)量的分選磁珠、耗材及設(shè)備,滿足客戶的研發(fā)和生產(chǎn)需求。目前已上新針對小鼠免疫細(xì)胞的CD3、CD4、CD8陰選試劑盒和分離磁鐵,針對小鼠免疫細(xì)胞的科研級CD4、CD8陽選磁珠,后續(xù)產(chǎn)品持續(xù)開發(fā)中。
翌圣生物提供小鼠T細(xì)胞分選整體解決方案
表3. 翌圣小鼠T細(xì)胞分選系列產(chǎn)品選購指南
產(chǎn)品定位 | 小鼠T細(xì)胞陰選試劑盒(陰選,無柱分離) | 小鼠T細(xì)胞陽選磁珠(陽選,有柱分離) | |||
產(chǎn)品貨號 | 37653ES | 37657ES | 37661ES | 37607ES | 37611ES |
產(chǎn)品名稱 | Mouse CD3+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) | Mouse CD4+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) | Mouse CD8+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) | Mouse CD4 Nanobeads | Mouse CD8 Nanobeads |
規(guī)格 | 10T/ 50T/ 100T | 10T/ 50T/ 100T | |||
分選能力 | Up to 1×108 cells/Up to 5×108 cells/Up to 1×109 cells | Up to 1×108 cells/Up to 5×108 cells/Up to 1×109 cells | |||
有效期 | 2~8℃保存,有效期1年。 | 2~8℃避光保存,有效期6個(gè)月。 | |||
產(chǎn)品特點(diǎn) | 操作簡單:無需分選柱,使用磁性分離器即可實(shí)現(xiàn)目的細(xì)胞的分離。 純度高:分選細(xì)胞純度可達(dá)95%以上; 速度快:15分鐘即可分選得到目的細(xì)胞。 活性好:陰性分選,磁珠不與細(xì)胞直接接觸,分選后細(xì)胞無異常激活,不影響下游實(shí)驗(yàn)。 | 安全性高:磁珠粒徑(50~100 nm)與進(jìn)口競品等同,低毒。 效果好:純度高、活性高、回收率高。 操作方便:生物可降解基質(zhì)、無需額外去除。 質(zhì)量高:穩(wěn)定性高、兼容性高。 |
測試數(shù)據(jù)
小鼠T細(xì)胞陰選試劑盒測試
圖1. 翌圣小鼠CD3、CD4、CD8分選試劑盒(陰選)分選免疫細(xì)胞的純度對比圖
備注:使用翌圣小鼠CD3、CD4、CD8分選試劑盒(陰選)從 C57BL/6 小鼠脾臟細(xì)胞中分選CD3、CD4、CD8 T細(xì)胞,通過流式檢測分選得到的細(xì)胞組分中 CD3、CD4、CD8 T細(xì)胞純度,分選后細(xì)胞純度分別為97.6%、98.8%、97.1% 。
小鼠T細(xì)胞陽選磁珠測試
圖2. 翌圣小鼠CD4、CD8分選磁珠(陽選)和進(jìn)口競品分選免疫細(xì)胞的純度、回收率、細(xì)胞活率對比圖
備注:分別使用翌圣小鼠CD4、CD8分選磁珠與進(jìn)口競品磁珠從C57BL/6 小鼠脾臟細(xì)胞中分選CD4、CD8 T細(xì)胞,翌圣小鼠CD4、CD8分選磁珠分選后細(xì)胞的純度、回收率、細(xì)胞活率均與進(jìn)口競品相當(dāng)。
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品定位 | 產(chǎn)品名稱 | 貨號 | 規(guī)格 | 分選能力 |
小鼠T細(xì)胞陰選試劑盒 (陰選,無柱分離) | Mouse CD3+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) 小鼠CD3+T細(xì)胞分選試劑盒(陰選) | 37653ES10/50/60 | 10 T/50 T/ 100 T | Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |
Mouse CD4+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) 小鼠CD4+T細(xì)胞分選試劑盒(陰選) | 37657ES10/50/60 | 10 T/50 T/ 100 T | Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells | |
Mouse CD8+T Cell Isolation Kit(Negative Isolation) 小鼠CD8+T細(xì)胞分選試劑盒(陰選) | 37661ES10/50/60 | 10 T/50 T/ 100 T | Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells | |
5 mL金屬磁力架 | 80463ES03 | 1個(gè) | ||
小鼠T細(xì)胞陽選磁珠 (陽選,有柱分離) | Mouse CD4 Nanobeads 小鼠CD4分選磁珠 | 37607ES10/50/60 | 10 T/50 T/ 100 T | Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |
Mouse CD8 Nanobeads 小鼠CD8分選磁珠 | 37611ES10/50/60 | 10 T/50 T/ 100 T | Up to 1×108 cells/ Up to 5×108 cells/ Up to 1×109 cells |
相關(guān)產(chǎn)品
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