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應(yīng)用Corning淋巴細(xì)胞無血清培養(yǎng)基KBM 591擴(kuò)增T細(xì)胞
免疫細(xì)胞療法在治療多種疾病包括腫瘤方面具有巨大的前景，免疫細(xì)胞種類包括自體CAR-T、通用型CAR-T、多種來源的NK細(xì)胞，以及來源于腫瘤組織的TIL等。這些免疫療法應(yīng)用需要免疫細(xì)胞的離體擴(kuò)增到高細(xì)胞密度，同時(shí)不會(huì)損失相應(yīng)細(xì)胞表型和功能。
Corning淋巴細(xì)胞無血清培養(yǎng)基KBM591（Corning 88-591-CM，以下簡(jiǎn)稱為Corning 591培養(yǎng)基）支持在不同激活和擴(kuò)增條件下（包括基因修飾方案）對(duì)各種T細(xì)胞群體進(jìn)行體外擴(kuò)增和培養(yǎng)，并且適用于不添加自體血漿的多種免疫細(xì)胞培養(yǎng)，包括T細(xì)胞、NK細(xì)胞等。
Corning 591擴(kuò)增T細(xì)胞能力
對(duì)于T細(xì)胞的增殖，如圖1所示，起始量為2 x 106個(gè)T細(xì)胞經(jīng)過CD3/CD28磁珠激活后，分別在Corning 591培養(yǎng)基及其他品牌培養(yǎng)14天，其中培養(yǎng)在Corning 591培養(yǎng)基中的T細(xì)胞在14天培養(yǎng)后擴(kuò)增了接近300倍，總細(xì)胞量接近6 x 108個(gè)細(xì)胞，顯著高于其他品牌培養(yǎng)基中所獲得的細(xì)胞總量。
利用流式細(xì)胞術(shù)對(duì)所得細(xì)胞的表型進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，培養(yǎng)在Corning 591培養(yǎng)基及品牌2培養(yǎng)基中的細(xì)胞CD3+/CD8+比例高于其他品牌（表1）。
圖1. 從PBMC分離的T細(xì)胞在不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)14天的生長(zhǎng)水平
表1 在不同培養(yǎng)基中培養(yǎng)后T細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)、活力及表型分析
Corning 591支持不同來源T細(xì)胞擴(kuò)增
我們使用隨機(jī)來源的T細(xì)胞在Corning 591培養(yǎng)基中使用不同的起始細(xì)胞量進(jìn)行擴(kuò)增。供體1和供體2來源的T細(xì)胞，經(jīng)過磁珠活化后在Corning 591培養(yǎng)基及品牌1培養(yǎng)基種培養(yǎng)，起始培養(yǎng)細(xì)胞數(shù)分別為2 x 106（供體1）和1 x 106（供體2）。經(jīng)過14天培養(yǎng)，供體1的PBMC分離的T細(xì)胞在Corning 591培養(yǎng)基中的擴(kuò)增倍數(shù)約為300倍；供體2的PBMC分離的T細(xì)胞在Corning 591培養(yǎng)基中培養(yǎng)至12天時(shí)擴(kuò)增倍數(shù)即達(dá)到了275倍（圖2，圖3）。由此可見，對(duì)于不同供體來源的PBMC，以及不同的起始培養(yǎng)細(xì)胞量，Corning 591培養(yǎng)基均能夠支持T細(xì)胞的迅速擴(kuò)增。
圖2. 不同來源T細(xì)胞在Corning 591培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)水平
圖3. 不同來源T細(xì)胞在培養(yǎng)終點(diǎn)時(shí)的擴(kuò)增倍數(shù)
Corning淋巴細(xì)胞無血清培養(yǎng)基591可以滿足無血清條件下大量擴(kuò)增T細(xì)胞。
在Corning淋巴細(xì)胞無血清培養(yǎng)基591中不同供體來源的T細(xì)胞擴(kuò)增倍數(shù)相較競(jìng)品培養(yǎng)基高出近30%。
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