糞大腸菌群的分類標(biāo)準(zhǔn)與檢測方法及檢驗(yàn)注意事項(xiàng)!
一、菌種簡介
糞大腸菌,生長于人和溫血動物腸道中的一組腸道細(xì)菌。糞大腸菌群是生長于人和溫血動物腸道中的一組腸道細(xì)菌,隨糞便排出體外,約占糞便干重的1/3以上,故稱為糞大腸菌群。
二、術(shù)語釋義
糞大腸菌群是大腸菌群的一種,受糞便污染的水、食品、化妝品和土壤等物質(zhì)均含有大量的這類菌群。若檢出糞大腸菌群即表明已被糞便污染。
二、分類
1、大腸菌群是指一群好氧及兼性厭氧,在37℃、24h能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽孢桿菌,它主要來源于人畜糞便,通??勺鳛樗w糞便污染的指標(biāo)菌大腸菌群。
2、大腸菌群是指37℃生長時能發(fā)酵乳糖,在24h內(nèi)產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭陰性無芽孢桿菌,除包括大腸埃希氏桿菌屬外,還包括腸桿菌科的腸桿菌屬、枸椽酸菌屬、克雷伯菌屬。
3、大腸菌群是指一群能在36℃,24h內(nèi)發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣,需氧和兼性厭氧的革蘭陰性無芽胞桿菌.它主要包括腸桿菌科的大腸埃希氏菌、枸椽酸桿菌、克雷伯氏菌和陰溝腸桿菌。
三、文獻(xiàn)來源
大腸菌群并非細(xì)菌學(xué)分類命名,而是衛(wèi)生細(xì)菌領(lǐng)域的用語,它不代表某一個或某一屬細(xì)菌,而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關(guān)的細(xì)菌,這些細(xì)菌在生化及血清學(xué)方面并非一致,其定義為:需氧及兼性厭氧、在37℃能分解乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。一般認(rèn)為該菌群細(xì)菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。
大腸菌群分布較廣,在溫血動物糞便和自然界廣泛存在。調(diào)查研究表明,大腸菌群細(xì)菌多存在于溫血動物糞便、人類經(jīng)?;顒拥膱鏊约坝屑S便污染的地方,人、畜糞便對外界環(huán)境的污染是大腸菌群在自然界存在的主要原因。糞便中多以典型大腸桿菌為主,而外界環(huán)境中則以大腸菌群其他型別較多。
大腸菌群是作為糞便污染指標(biāo)菌提出來的,主要是以該菌群的檢出情況來表示食品中有否糞便污染。大腸菌群數(shù)的高低,表明了糞便污染的程度,也反映了對人體健康危害性的大小。糞便是人類腸道排泄物,其中有健康人糞便,也有腸道患者或帶菌者的糞便,所以糞便內(nèi)除一般正常細(xì)菌外,同時也會有一些腸道致病菌存在(如沙門氏菌、志賀氏菌等),因而食品中有糞便污染,則可以推測該食品中存在著腸道致病菌污染的可能性,潛伏著食物中毒和流行病的威脅,必須看作對人體健康具有潛在的危險(xiǎn)性。
糞大腸菌群和飲用水,國家飲用水標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,飲用水中大腸菌群不得檢出。
四、檢測方法
1、糞大腸菌群檢測方法
糞大腸菌為總大腸菌群的一個亞種;直接來自糞便,除了它耐熱,在44-44.5℃的高溫條件下仍可生長繁殖并將色氨酸代謝成吲哚,其他特性均與總大腸菌群相同。
總大腸菌群中的細(xì)菌除生活在腸道中外,在自然環(huán)境中的水與土壤中也經(jīng)常存在,但此等在自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的最合適溫度為25℃左右,如在37℃培養(yǎng)則仍可生長,但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃,則不再生長,而直接來自糞便的大腸菌群細(xì)菌,習(xí)慣于37℃左右生長,如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長。因此,可用提高培養(yǎng)溫度方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分。在37℃培養(yǎng)生長的大腸菌群,包括在糞便內(nèi)生長的大腸菌群稱為“總大腸菌群”(Total coliform);在44.5℃仍能生長的大腸菌群,稱為“糞大腸菌群”(Fecal coliform),糞大腸菌群細(xì)菌在衛(wèi)生學(xué)上具有重要的意義。
2、檢驗(yàn)注意事項(xiàng)
(1)將接種好的樣品放人恒溫水浴箱或隔水式恒溫培養(yǎng)箱時,箱內(nèi)溫度一定要求達(dá)到所要求的溫度(44±1℃)時,方可放入。如用恒溫水浴箱其水面要高于接種物面,放濾膜的培養(yǎng)皿要沉到水浴箱底部。
(2)MFC培養(yǎng)基中苯胺藍(lán)的純度和質(zhì)量往往影響菌落的顏色,根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果用進(jìn)口苯胺藍(lán)加O.1g,用國產(chǎn)苯胺藍(lán)加0.2g,培養(yǎng)出的糞大腸菌菌落顏色較典型。但國產(chǎn)苯胺藍(lán)的性能是否同樣穩(wěn)定尚不能肯定。因此,制好的培養(yǎng)基在使用前,先接種典型糞大腸菌,以觀察對比菌落的顏色。
玫紅酸高壓后會分解,配好的試液應(yīng)在2-lO℃保存不超過2周,如顏色由暗紅變成棕色沉淀時應(yīng)棄去。如雜菌污染少,且加與不加玫紅酸對菌落計(jì)數(shù)無影響時,可不加。
(3)在濾膜上生長的菌落除挑取藍(lán)色菌落外,淺藍(lán)色菌落或淺藍(lán)色中心較深的菌落也應(yīng)挑取。
(4)生活飲用水通常都是經(jīng)氯處理消毒的,水中含有一定量的余氯,使大腸菌群處于受損或受抑制狀態(tài),在采集水樣時應(yīng)加硫代硫酸鈉脫氯,使此受損的細(xì)菌得以復(fù)蘇與修復(fù),從而避免計(jì)數(shù)結(jié)果偏低甚至假陰性出現(xiàn)。
(5)采樣后水樣的正確保存很重要,如保存不當(dāng)可使檢樣中的大腸菌群細(xì)菌死亡或在一定條件下再生長,這些都將影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。檢驗(yàn)室接到水樣后,應(yīng)立即檢驗(yàn)。如因故不能檢驗(yàn)時,應(yīng)立即置于冰箱內(nèi)并于2小時內(nèi)檢驗(yàn)。
關(guān)于水樣儲存時間與溫度對大腸菌群數(shù)的影響,Lonsans等報(bào)告認(rèn)為水樣中大腸菌群數(shù)不多時,則冰箱保存與室溫保存相差不大;如水樣中菌數(shù)多時,則在室溫(23-39.5℃)內(nèi)保存比在冰箱(0-1O℃)中保存菌數(shù)的減少速度快。
五、檢測儀器
水質(zhì)糞大腸菌群檢測儀器
JMS2009型大腸菌群在線快速監(jiān)測儀,可以對大腸桿菌,總大腸菌群,糞大腸菌群,總糞大腸桿菌等多種生活中常見菌類進(jìn)行快速檢測。
1、儀器特點(diǎn)
自動檢測
操作簡便,不需要復(fù)雜、昂貴的實(shí)驗(yàn)室器材和專業(yè)人員即可現(xiàn)測試
自動取樣頻率可編程設(shè)定:從每小時一次~每24小時一次
檢測周期短,小于12小時(分析速度快)
可高通量連續(xù)檢測
真正做到實(shí)時、在線、自動檢測
多種輸出功能
糞大腸菌群檢測儀
2、測量原理
FC培養(yǎng)液是宜大腸菌群和糞大菌群生長的
微生物培養(yǎng)基,大腸菌群和糞大腸菌群含有一種特異
性酶,本系統(tǒng)采用的底物可被這種特異性酶分解釋放
出一種化合物,使培養(yǎng)基的顏色發(fā)生變化。本系統(tǒng)通
過檢測培養(yǎng)基的顏色變化,檢測水體中的大腸菌群及
糞大腸菌群。FC培養(yǎng)液是產(chǎn)品。
3、應(yīng)用范圍
適用于飲用水、地表水、地下水及污水等大腸菌群、
糞大腸菌群的自動監(jiān)測。
4、樣品分析方法
將水樣注入FC培養(yǎng)液,在一定溫度下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)
(大腸菌群需恒溫36.5°C,糞大腸菌需恒溫44.5°C)。通
過連續(xù)光度測量,檢測水樣中的大腸菌群和糞大腸菌群。
每個樣品測量結(jié)束后,儀器自動對管路進(jìn)行滅菌處理。
5、技術(shù)參數(shù)
采樣體積:1.5L
檢出限:1個/100ml
采樣頻率:1小時(可調(diào))
測量周期:最長12小時
檢測時間:少于12小時
培養(yǎng)溫度:36.5°C或44.5°C
管路消毒:每次測量前,污染后
管路清洗:每次管路消毒后
試劑:培養(yǎng)液:1瓶/樣品
次氯酸鈉(有效氯:0.5%):5L星期
零點(diǎn)校正:每次進(jìn)樣前自動校正
參比溶液:培養(yǎng)液
通訊接口:RS232或485
報(bào)警信號:控制器故障、溫度故障、微處理
故障、儀器故障
遠(yuǎn)程控制:遠(yuǎn)程控制啟動和待機(jī)
環(huán)境:防潮、防塵、溫度0~40°C
電源:220VAC/50HZ
防護(hù)等級:IP55
外型尺寸:
重量:100kg
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