做Western Blot雜帶多？免疫熒光背景像星空？ELISA檢測(cè)總翻車？

別急著懷疑自己的手！可能是你的抗體沒(méi)選對(duì)！

今天手把手教你避坑，輕松get靠譜抗體選擇技巧！

?【選抗體必看3步法】

??Step 1：明確靶標(biāo)

?? 了解待測(cè)靶標(biāo)：在uniprot查詢待測(cè)蛋白信息，包括名稱、分子量、陽(yáng)性組織/細(xì)胞種類、亞細(xì)胞定位等。

??實(shí)驗(yàn)應(yīng)用目的：研究靶蛋白細(xì)胞定位可選IHC/IF；研究靶蛋白是表達(dá)或定量可選WB，ELISA。

??實(shí)驗(yàn)樣本：明確實(shí)驗(yàn)樣本，選擇合適的陽(yáng)性對(duì)照。

??Step 2：了解抗體信息

?? 抗體名稱（Antibody name）: 含靶蛋白名稱，磷酸化抗體含磷酸化位點(diǎn)；

??抗體貨號(hào)（Catalog number）: 抗體獨(dú)*無(wú)*標(biāo)記，相同貨號(hào)抗體也會(huì)有不同批次號(hào)，如需重復(fù)實(shí)驗(yàn)的，選同一批號(hào)抗體。

??宿主（Host）: 抗體來(lái)源物種，常見(jiàn)有Rabbit, Mouse, Human,等，避免選擇與樣本物種相同來(lái)源的抗體，防止同源高背景。

??克隆類型（Clonality）: 多克隆（Polyclonal）多抗原表位，親和性高，有利信號(hào)放大，適用表達(dá)水平低和抗原微小修飾的檢測(cè)；單克隆(Monoclonal)單一抗原表位，特異性高，批次一致性高，適用要求高特異性和重復(fù)實(shí)驗(yàn)的研發(fā)。

??檢測(cè)應(yīng)用 （Tested applications）: 抗體檢測(cè)過(guò)的實(shí)驗(yàn)類型比如WB, IHC，ELISA等，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇。

??反應(yīng)物種（Reactivity）: 抗體檢測(cè)過(guò)的物種，確保里面包含待測(cè)樣本的物種。

??免疫原（Immunogen）: 包含多肽和重組蛋白，多肽片段短，獲得的抗體特異性一般沒(méi)有重組蛋白作為免疫原的高，比較抗體免疫原的Uniprot ID信息，是否是你要測(cè)的目的蛋白。

??抗體檢測(cè)結(jié)果圖：非常重要，根據(jù)抗體檢測(cè)結(jié)果可以分辨抗體的特異性和物種適應(yīng)性，有些抗體還提供敲除/敲低樣本驗(yàn)證圖，多物種交叉反應(yīng)數(shù)據(jù)的更優(yōu)。

??其他考慮因素：抗體價(jià)格或貨期，售后服務(wù)有保障。

??Step 3：小樣測(cè)試

??購(gòu)買小規(guī)格進(jìn)行小樣測(cè)試；

??建議先跑陽(yáng)性對(duì)照，摸索**抗體稀釋比例。