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校準(zhǔn)PE紫外分光光度計(jì)需要遵循一系列詳細(xì)且系統(tǒng)的步驟，以確保儀器的準(zhǔn)確性和可靠性。以下是具體的校準(zhǔn)步驟：
一、校準(zhǔn)前的準(zhǔn)備工作
1.儀器檢查與清潔
確保紫外分光光度計(jì)安裝在穩(wěn)定、干燥、低溫且無(wú)振動(dòng)的環(huán)境中，周?chē)鸁o(wú)強(qiáng)磁場(chǎng)干擾和腐蝕性氣體。
檢查儀器外觀是否有損壞，各部件連接是否正常，如比色皿架、電源線等。
使用干凈的擦鏡紙或柔軟的布輕輕擦拭儀器的外殼、樣品室、比色皿等，去除灰塵、油污和其他雜質(zhì)。
2.試劑準(zhǔn)備
根據(jù)校準(zhǔn)需求，準(zhǔn)備一系列濃度已知的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用于波長(zhǎng)校準(zhǔn)和吸光度校準(zhǔn)。例如，常用的重鉻酸鉀溶液可用于可見(jiàn)光區(qū)的校準(zhǔn)，硝酸鈉溶液可用于紫外光區(qū)的校準(zhǔn)。
準(zhǔn)備好純?nèi)軇┳鳛榭瞻自噭?，如蒸餾水、乙醇等，其純度應(yīng)符合分析要求。
3.儀器預(yù)熱
打開(kāi)紫外分光光度計(jì)的電源開(kāi)關(guān)，讓儀器預(yù)熱一段時(shí)間，通常預(yù)熱10~30分鐘，使儀器的光源、檢測(cè)器等部件達(dá)到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。
二、波長(zhǎng)校準(zhǔn)
1.選擇標(biāo)準(zhǔn)溶液
選擇合適的具有已知最大吸收波長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)溶液，將其倒入比色皿中，用擦鏡紙擦干比色皿外壁，避免手上的油污對(duì)比色皿透光性產(chǎn)生影響。
將裝有標(biāo)準(zhǔn)溶液的比色皿放入樣品室中的比色皿架上，注意放置方向要正確，使光路通過(guò)溶液。
2.設(shè)置參數(shù)
在儀器的操作界面上，選擇光譜掃描模式，設(shè)置掃描的波長(zhǎng)范圍應(yīng)包括標(biāo)準(zhǔn)溶液的最大吸收波長(zhǎng)，掃描速度適中，采樣間隔一般為1nm或更小。
啟動(dòng)掃描程序，儀器將自動(dòng)繪制出標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸收光譜曲線。
3.調(diào)整與記錄
觀察吸收光譜曲線，找到最大吸收波長(zhǎng)對(duì)應(yīng)的波峰位置。
如果該波峰位置與標(biāo)準(zhǔn)溶液的已知最大吸收波長(zhǎng)不一致，說(shuō)明儀器的波長(zhǎng)存在偏差。此時(shí)，需要通過(guò)儀器上的波長(zhǎng)調(diào)節(jié)按鈕或相關(guān)操作菜單，對(duì)波長(zhǎng)進(jìn)行微調(diào)，使測(cè)量得到的最大吸收波長(zhǎng)與標(biāo)準(zhǔn)值相符。
反復(fù)調(diào)整和測(cè)量，直到波長(zhǎng)誤差在允許范圍內(nèi)，一般要求波長(zhǎng)準(zhǔn)確度誤差不超過(guò)±0.5nm。
三、吸光度校準(zhǔn)
1.空白校正
取出裝有標(biāo)準(zhǔn)溶液的比色皿，將裝有純?nèi)軇┑谋壬蠓湃霕悠肥抑械膮⒈瘸匚恢?，關(guān)上樣品室蓋。
在操作界面上選擇吸光度測(cè)量模式，點(diǎn)擊“調(diào)零”或“空白校正”按鈕，儀器將以純?nèi)軇榭瞻?，將吸光度值調(diào)整為零。這樣可以消除溶劑本身對(duì)光的吸收以及比色皿等因素對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響。
2.標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)量
將裝有標(biāo)準(zhǔn)溶液的比色皿放入樣品室中的樣品池位置，關(guān)上樣品室蓋。
如果實(shí)際測(cè)量值與理論值存在偏差，說(shuō)明儀器的吸光度存在誤差。此時(shí)，需要通過(guò)儀器上的吸光度調(diào)節(jié)按鈕或相關(guān)操作菜單，對(duì)吸光度進(jìn)行校準(zhǔn)，使測(cè)量值與理論值相符。
可以多次重復(fù)測(cè)量和校準(zhǔn)，直到吸光度誤差在允許范圍內(nèi)，一般要求吸光度準(zhǔn)確度誤差不超過(guò)±0.005A。
四、性能檢查與驗(yàn)證
1.重復(fù)性檢查
使用同一標(biāo)準(zhǔn)溶液，在相同的條件下，連續(xù)多次測(cè)量其吸光度值，計(jì)算測(cè)量結(jié)果的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。一般來(lái)說(shuō)，RSD應(yīng)小于0.5%，以證明儀器的重復(fù)性良好。
2.線性范圍檢查
配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照從低到高的順序依次測(cè)量其吸光度值。
然后以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。觀察標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系是否良好，相關(guān)系數(shù)應(yīng)大于0.999，以證明儀器在測(cè)量范圍內(nèi)的線性關(guān)系正常。
五、注意事項(xiàng)
1.校準(zhǔn)環(huán)境應(yīng)保持穩(wěn)定，避免溫度、濕度等環(huán)境因素對(duì)校準(zhǔn)結(jié)果產(chǎn)生影響。
2.使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)應(yīng)確保其有效期內(nèi)、儲(chǔ)存條件正確，以保證其準(zhǔn)確性。
3.校準(zhǔn)過(guò)程中應(yīng)遵循操作規(guī)程，避免誤操作導(dǎo)致儀器損壞或校準(zhǔn)結(jié)果失真。
4.校準(zhǔn)結(jié)果應(yīng)及時(shí)記錄并保存，以便后續(xù)分析和比對(duì)。
通過(guò)遵循以上步驟和注意事項(xiàng)，可以確保PE紫外分光光度計(jì)的準(zhǔn)確性和可靠性，為實(shí)驗(yàn)結(jié)果提供有力的保障。
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