顯微鏡物鏡的技術(shù)指標(biāo)

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王瓊
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　　數(shù)值孔徑zui大值為1.4，這個(gè)數(shù)值在理論上和技術(shù)上都達(dá)到了極限。目前，有用折射率高的溴萘作介質(zhì)，溴萘的折射率為1.66，所以NA 值可大于1.4。

　　數(shù)值孔徑是顯微鏡物鏡的重要參數(shù)，決定了物鏡的分辨率。與物鏡的放大倍數(shù)，工作距離，景深有直接關(guān)系。

　　一般來(lái)說(shuō)，它與分辨率成正比，與放大率成正比，焦深與數(shù)值孔徑的平方成反比，NA值增大，視場(chǎng)寬度與工作距離都會(huì)相應(yīng)的變小。

　　數(shù)值孔徑與分辨率成正比，但這并不是說(shuō)在選擇物鏡的時(shí)候一定要選擇數(shù)值孔徑（NA）zui大才是，因?yàn)槲镧R還會(huì)有很多其他重要參數(shù)，比如熒光透過(guò)率、工作距離等等，根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)選擇。

　　焦深

　　焦深也叫景深，其定義是：指使用顯微鏡觀(guān)察和拍攝樣品表面時(shí)，從對(duì)準(zhǔn)焦點(diǎn)的位置開(kāi)始，改變物鏡與樣品表面的距離時(shí)，對(duì)焦能夠保持清晰的范圍。肉眼的調(diào)整能力因人而異，所以焦深也會(huì)出現(xiàn)因人而異的情況?，F(xiàn)在常用的是與實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較一致的Berek 公式。

　　齊焦距離

　　齊焦距離是指，對(duì)準(zhǔn)焦點(diǎn)時(shí)的物鏡鏡體定位面到物體表面的距離。OLYMPUS UIS2/UIS光學(xué)系統(tǒng)物鏡的齊焦距離為45 mm，ZEISS ICCS光學(xué)體統(tǒng)、LEICA HC光學(xué)系統(tǒng)的齊焦距離也是45mm，NIKON CFI 60 光學(xué)系統(tǒng)的齊焦距離是60mm。

　　工作距離

　　工作距離也叫物距，即指物鏡前透鏡的表面到被檢物體之間的距離。

　　鏡檢時(shí)，被檢物體應(yīng)處在物鏡的一倍至二倍焦距之間。因此，它與焦距是兩個(gè)概念，平時(shí)習(xí)慣所說(shuō)的調(diào)焦，實(shí)際上是調(diào)節(jié)工作距離。在物鏡數(shù)值孔徑一定的情況下，工作距離短孔徑角則大。數(shù)值孔徑大的高倍物鏡，其工作距離小。