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茁彩生物?PAS糖原染色

來源:上海茁彩生物科技有限公司   2023年06月05日 09:11  

PAS染色又稱過碘酸雪夫染色,糖原染色。一般用來顯示糖元和其它多糖物質(zhì)。過碘酸能使細(xì)胞內(nèi)的多糖乙二醇基氧化成二醛,再與Schiff氏液的無色品紅結(jié)合,紅色,定位于胞漿上 。還可以觀察腎小球基底膜、結(jié)腸杯狀細(xì)胞中性黏液物質(zhì)、阿米巴滋養(yǎng)體和霉菌的著色。


實驗準(zhǔn)備:

1、10g/L過碘酸

2、Schiff染液:

堿性品紅 0.5g

DH2O 100ml

煮沸后,待片刻,加入堿性品紅,振蕩數(shù)分鐘使品紅溶解,冷至50℃加入1M的鹽酸20ml,混勻。待冷卻至25℃加入偏重亞硫酸鈉0.5g,混合,置于帶塞的棕色瓶中,放于暗處24小時,染液為無色,如為微紅則加活性炭1-2g,混合過濾,如過濾液仍有紅色,應(yīng)再加少許活性炭,時紅色被吸收為止。制成后置于棕色瓶內(nèi)保存在冰箱備用,如變?yōu)榧t色,則不能使用。

4、蘇木素液:

蘇木素 0.9g

95%乙醇 10ml

銨(鉀)明礬 20g

DH2O 200ml

將蘇木素溶于95%的乙醇,鉀明礬溶于水(可加熱),然后將蘇木素液加入明礬液中混合,用強火煮沸后加1化汞0.5g,迅速攪拌,成深紫色,迅速移入冷水中,次日過濾,臨用時取此液95ml加冰醋酸5ml,可使細(xì)胞著色清楚。

方法

1、將新鮮血片或骨髓片用95%乙醇固定10分鐘;

2、10g/L過碘酸液作用20分鐘;

3、DH2O洗滌幾次,晾干;

4、Schiff染液,60分鐘;

5、用自來水洗滌15分鐘(細(xì)水長流沖洗);

6、蘇木素染液10分鐘;

7、自來水沖洗15分鐘,待干。


結(jié)果判讀:

  糖原、中性粘液物質(zhì)、軟骨基質(zhì)、植物的真菌和細(xì)胞壁、上皮的基膜等均呈紫紅色,細(xì)胞核淺藍(lán)色


送樣運輸要求:

     1.樣本放置于20倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運輸送樣。切勿固定時間過長,切勿冷凍結(jié)冰。

     2.石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。


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