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白益生物--論elisa試劑盒的操作技巧

來源:上海白益生物科技有限公司   2022年07月06日 13:12  

 

ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是 ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等;ELISA試劑盒適用于體外定性檢測血清或血漿等樣本中的目的蛋白或者其它待測物,自從60-70年代問世以來,得到眾多科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。為了保證ELISA試劑盒實驗質(zhì)量,我們需要掌握一些小技巧以助于實驗的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?


白益生物公司總結(jié)了ELISA試劑盒的17種操作技巧,如若您掌握了這些實驗技巧之后,在做ELISA實驗中,試驗起來會更熟練,大大的降低了實驗過程中的風(fēng)險,ELISA試劑盒實驗的入門新手掌握了這些知識后,操作起來都會快的多。


ELISA試劑盒17個相關(guān)操作技巧如下:


1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

2.合理安排檢測量,以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。

3.在吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

4.務(wù)必做雙孔實驗,這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

5.樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。

6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標板加上蓋或覆膜。

7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過氧化物酶工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的辣根過氧化物酶工作液。

8.ELISA試劑盒實驗中,加樣后及時放人孵箱,標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*。

9.剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

10.ELISA試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

11.每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。

12.手工洗板時每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標孔中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

13.對樣本的結(jié)果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。

14.用去離子水或雙蒸水配制溶液,切勿使用自來水。

15.在使用微量加樣器時,吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

16.吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。

17.吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。


 

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