用CRISPR/Cas12或Cas13新技術(shù)檢測DNA或RNA序列的特異性,通過酶識別一個特定的目標(biāo)序列,與該序列結(jié)合后,其核酸內(nèi)切酶活性被激活,并切割任何報告序列。該項技術(shù)可以很容易地與側(cè)流雜交檢測試紙條相結(jié)合,以顯示結(jié)果。
SHERLOCK
用CRISPR核酸酶進(jìn)行核酸檢測,博德研究所(Broad Institute)的研究人員近發(fā)表了一篇關(guān)于基于CRISPR的診斷平臺的文章,該平臺將核酸預(yù)擴增與CRISPR-Cas酶學(xué)相結(jié)合,用于特定識別所需的DNA或RNA序列。所述技術(shù)稱為SHERLOCK(specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking特異性高靈敏度酶報告解鎖)方法。這種方法可以很容易地與側(cè)流雜交檢測試紙條相結(jié)合,以快速顯示結(jié)果。CRISPR/Cas酶Cas12或Cas13通過與特定靶點結(jié)合而被激活。當(dāng)被激活時,內(nèi)切酶能夠切割非特異性的報告物。一個簡單的、無儀器和便攜式的LFA(lateral flow assay側(cè)流分析)雜交檢測試紙條方法讀出SHERLOCK結(jié)果。
SARS-CoV-2 檢測
布勞頓(Broughton et al.)等人開發(fā)了一種與CRISPR-Cas12相關(guān)的檢測方法,用于在30分鐘內(nèi)從患者RNA中檢測SARS-CoV-2,稱為DETECTR。
上游反轉(zhuǎn)錄(RT)與環(huán)介導(dǎo)等溫擴增(LAMP)同時進(jìn)行(RT-LAMP)。之后,進(jìn)行Cas12特異性病毒序列檢測和報告分子的裂解。后一步是通過我們的側(cè)流雜交試紙條檢測進(jìn)行可視化。它的主要優(yōu)點是不需要任何儀器就能顯示出快速的結(jié)果。
默瑞生物
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