液體活檢提取 cfDNA:兩性解離離子交換磁珠 MSP-ZEWB
MSP-ZEWB 對水溶蛋白非特異吸附低,提取細胞外游離核酸時可不去 蛋白(耐受殘留細胞干擾),提取效力強于硅醇磁珠,適合血漿、血清、羊 水中循環(huán)非細胞DNA(Circulatingcell-freeDNA,cfDNA)。需長時間保存所 提取的 cfDNA 則宜變性蛋白,終濃度>3.0M 鹽酸胍適用。
吸附核酸時 MSP-ZEWB 對核酸片段長度的選擇性與硅醇磁珠相反: 對短鏈核酸效力強于長鏈核酸。選擇提取短鏈核酸為MSP-ZEWB 特色。 提取cfDNA 備選流程:用蛋白酶 K 室溫處理液體樣品約 10min 滅活 其中DNA 酶;用吸附緩沖液調(diào)節(jié)混合物 pH 到 3.5~4.2 并稀釋以降低離子 強度,再加磁珠吸附 cfDNA;洗滌磁珠,后洗脫所吸附的 cfDNA。
提取樣品中短鏈 cfDNA,是 MSP-ZEWB 的優(yōu)勢應(yīng)用之一。
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