人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒北京方程生物公司現(xiàn)貨供應(yīng)
英文名稱:elisa試劑盒
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒的含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒水平。用純化的人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入 人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒 ,再與 HRP標(biāo)記的人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的 人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒呈正相關(guān)。 用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度 (OD值) ,通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒濃度。
Fibroblast Growth Factor 19
注意事項(xiàng):1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。2. 洗滌過(guò)程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽(yáng)性。3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。5. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。7. 底物請(qǐng)避光保存。8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。操作流程RNeasy Plus Micro Kit能從多達(dá)5 x 105個(gè)細(xì)胞或5 mg組織中分離總RNA,RNeasy Plus Mini Kit能夠從107個(gè)細(xì)胞或30 mg組織中分離總RNA。簡(jiǎn)潔的工作流程可在25分鐘內(nèi)純化得到已去除基因組DNA的RNA。樣本首先被裂解和勻質(zhì)化。裂解液流過(guò)gDNA Eliminator柱,在流過(guò)gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇,樣本再上樣到RNeasy離心柱。RNA結(jié)合到膜上,污染物被洗去。獲得高品質(zhì)RNA,RNeasy Plus Micro Kit的洗脫體積為14 ?l,RNeasy Plus Mini Kit的洗脫體積為30 ?l。處理不同的起始樣本可用不同的實(shí)驗(yàn)方案。實(shí)驗(yàn)方案的不同之處主要在于樣本的裂解和勻質(zhì)化。樣本上樣到gDNA Eliminator柱之后的步驟就類似。使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Micro Kit提供)進(jìn)行組織破碎和勻質(zhì)化時(shí),可能會(huì)產(chǎn)生過(guò)多泡沫。在破碎和勻漿前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(單獨(dú)提供)可充分減少泡沫產(chǎn)生。Reagent DX經(jīng)仔細(xì)檢測(cè),表明配合此試劑盒使用不會(huì)影響RNA的純度或下游應(yīng)用。
樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用 PBS(PH7.2-7.4)稀釋胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬(wàn)/ml 左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的 PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)?br />用。標(biāo)本融化后仍然保持 2-8℃的溫度。加入一定量的 PBS(PH7.4) ,用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分) 。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
人血紅蛋白γ2(英文簡(jiǎn)寫:HBγ2)ELISA試劑盒
乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8(英文簡(jiǎn)寫:MFGE8)ELISA試劑盒
鈣黏蛋白26(英文簡(jiǎn)寫:CDH26)ELISA試劑盒
角蛋白7(英文簡(jiǎn)寫:KRT7)ELISA試劑盒
骨膜蛋白(英文簡(jiǎn)寫:POSTN)ELISA試劑盒
絲氨酸棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶長(zhǎng)鏈堿性亞基3(英文簡(jiǎn)寫:SPTLC3)ELISA試劑盒
Attractin蛋白(英文簡(jiǎn)寫:ATRN)ELISA試劑盒
蛋白酶體亞基α7(英文簡(jiǎn)寫:PSMα7)ELISA試劑盒
腦蛋白44樣蛋白(英文簡(jiǎn)寫:BRP44L)ELISA試劑盒
細(xì)胞外基質(zhì)磷酸糖蛋白(英文簡(jiǎn)寫:MEPE)ELISA試劑盒
分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(英文簡(jiǎn)寫:SFRP4)ELISA試劑盒
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