儀器室要保持整潔、干凈、無塵;配套設(shè)施布局合理。 ?
儀器室溫度應(yīng)相對穩(wěn)定,一般應(yīng)控制在20-25℃,保持恒溫;相對濕度為50-70%,室內(nèi)應(yīng)備有溫度計和濕度計。 ?
儀器室電源要求相對穩(wěn)定,電壓變化要小,配備不間斷穩(wěn)壓電源,防止意外停電。 ?
溶劑和流動相的要求: 所有的流動相都要使用0.22um的濾膜過濾,水相要新配,并不得超過二天。樣品必需使用0.22um的膜過濾。 ?
機械泵的振氣: 于ESI源,至少每星期做一次,對于APCI源,每天做一次。振氣時需停止樣品采集、停止流動相、關(guān)閉高壓、關(guān)閉所有氣流,關(guān)閉離子源內(nèi)的真空隔離閥。 ?
開高壓之前一定要先開氮氣;關(guān)氮氣之前一定要先關(guān)高壓。在沒開氮氣和高壓之前不要開流動相或流動相是waste狀態(tài)。 ?
ESI離子化與溶劑密切相關(guān),在使用某些溶劑和添加物需要注意以下幾個方面:TFA多用于蛋白質(zhì)和多肽分析,但對ESI離子化有抑制效應(yīng);三乙胺(TEA)在m/z 102處有較強[M+H]+峰,有可能會抑制某些堿性化合物在正離子ESI條件下的離子化,也有可能會增強某些堿性化合物在負離子ESI條件下的響應(yīng)。 ?
要避免使用非揮發(fā)性的鹽 (phosphate, borate, citrate,etc.);表面活性劑、清潔劑和去污劑 (會抑制離子化);以及無機酸 (sulphuric acid, phosphoric acid etc.)等。 ?
連接UPLC泵、色譜柱、注射泵以及ESI探頭時,要將儀器置standby狀態(tài)。 ?
當改變分辨率的時候,儀器的質(zhì)量數(shù)也會有輕微的偏移,所以在不同分辨率的條件下,應(yīng)該做質(zhì)量數(shù)校正。 ?
樣品貯存在塑料離心管中,其中的添加劑很容易混入,尤其是被有機溶劑浸泡時間較長時,會產(chǎn)生干擾物信號。 ?
工作站計算機不要安裝與儀器操作無關(guān)的軟件,要經(jīng)常清理計算機磁盤碎片,定期查殺病毒,定期備份實驗數(shù)據(jù)。
儀器應(yīng)定期檢查,并有專人管理,負責維護保養(yǎng)。 ?
實驗完畢要清洗進樣針、進樣閥等,用過含酸的流動相后,色譜柱、離子源都要用甲醇/水沖洗,延長儀器壽命。 ?
定期清洗樣品錐孔:關(guān)閉隔離閥,取下樣品錐孔,先用甲醇:水:甲酸(45:45:10)的溶液超聲清洗10分鐘,然后在分別用超純水和甲醇各溶液超聲清洗10分鐘,待晾干后再安裝到儀器上。當靈敏度下降時,需要清洗Source、二級錐孔和六級桿。 ?
定期(每星期)檢查機械泵的油的狀態(tài),如果發(fā)現(xiàn)渾濁、缺油等狀況,或者已經(jīng)累積運行超過3000小時,要及時更換機械泵油。
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