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中級(jí)會(huì)員 | 第17年

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ELISA 的檢測(cè)

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標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制方法

 

可以采用各種繪圖軟件來(lái)繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線,下面以“Curve  Exert1.3”軟件為例,繪制ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線的方法如下;

1 啟動(dòng)“Curve  Expert1.3”

2.X軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值,Y軸輸入所對(duì)應(yīng)的濃度值,如圖:

 

3.單擊[運(yùn)行]  按鈕,出現(xiàn)如下對(duì)話框

4.單擊[ok]按鈕,出現(xiàn)如下兩個(gè)對(duì)話框,關(guān)閉下面一個(gè)對(duì)話框

 

5. 在對(duì)話框的右上角出現(xiàn)一些曲線的名稱(chēng),從“1”開(kāi)始依次點(diǎn)擊曲線名稱(chēng),在右下角會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)擬合的曲線,。

 

 

 

 

6. 根據(jù)擬合的曲線選取ELISA擬合度*的曲線雙擊,出現(xiàn)如下對(duì)話框:

注意:選擇系數(shù)(即“r”值)的曲線方程來(lái)進(jìn)行運(yùn)算。在下面的對(duì)話框

右上角有“r”值 ,當(dāng)“r”值越接近1擬合度越好

 

7.按[Ctrl]鍵+[L]鍵,出現(xiàn)如下對(duì)話框:

 

8.輸入標(biāo)準(zhǔn)的OD值,單擊[Calculate]按忸,即可得到待測(cè)蛋白的實(shí)際含量。(標(biāo)本稀釋了N倍,運(yùn)算出的數(shù)值應(yīng)在成以N)。

 

9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程,可在步驟6的對(duì)話框空白處右擊,選擇”Information”

 

10. 得到如下對(duì)話框:點(diǎn)擊“Copy”

 

在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù):

Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)

Coefficient Data:

a =   -21.531017

b =  212.05019

c =  -0.24054479

d =  0.018060778

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