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一、色譜柱簡介
Ultimate®XB-C18 色譜柱采用超純硅膠為基質(zhì),進行雙封尾鍵合工藝;具有寬的pH 使用范圍(1.5-10),適應(yīng)于大部分藥物,環(huán)境和化工行業(yè)的化合物分離,對堿性和極性化合物具有最佳的峰形,是目前市場上的C18 分析柱之一,可替代 Waters Symmetry C18, Agilent Zorbax XDB C18, Phenomenex Luna C18, Supelcosil LC-18-DB, YMC ODS-AM, Alltima C18, GL-science Inertsil ODS-2 等。
二、色譜柱特點
超純?nèi)嗫浊蛐喂枘z,純度>99.999%固定相鍵合、雙封尾技術(shù)
高柱效:理論塔板數(shù)> 90000/ 米
良好的峰形對稱性:拖尾因子控制在0.95-1.05
較寬pH范圍:適合pH 值 1.5-10.0 較長的使用壽命
優(yōu)良的批與批重現(xiàn)性
三、色譜柱參數(shù)
鍵合相 | C18 |
粒徑 | 3µm,5µm,10µm, |
孔徑 | 120? , 300? |
比表面積 | 320m2/g (120?),90m2/g (300?) |
載碳量 | 17%(120?),8%(300?) |
封尾 | 雙封尾 |
pH 值穩(wěn)定性 | 1.5-10.0 |
四、新柱活化
采用80%甲醇0.5ml/min 沖洗4小時,再換成分析流動相平衡;如果流動相 中含有緩沖鹽,請使用過渡流動相過渡后再換分析流動相平衡;
五、 日常維護
1、建議檢測前樣品和流動相進行過濾;
2、建議每天做完樣品后及時進行清洗;
3、常規(guī)檢測,測試完后直接把色譜柱反向連接采用90%有機相沖洗45min,最后保存;
4、使用緩沖鹽條件:
1)等度條件:使用緩沖鹽之前和之后都用過渡流動相以分析流速沖洗45min;
2)梯度條件:使用緩沖鹽之前與初始流動相組成相同的過渡流動相以分析流速沖洗45min;
注意:過渡流動相是指有機相和水相比例與分析流動相相同比例,只是不含有緩沖鹽;
3)緩沖鹽沖洗干凈后,采用90%有機相反向沖洗 60min,最后保存;注意:緩沖鹽溶液不能存留色譜柱中過夜;
5、色譜柱的保存
1)短時間內(nèi)色譜柱的保存
如果使用時間間隔不超過四天,保存到最后的有機溶劑水里面即可。
2)長時間色譜柱的保存
如色譜柱長時間不用,最后采用80%甲醇水用分析流速沖洗45min,將其從 HPLC儀中取下,用塑料塞頭將其密封,以免色譜柱內(nèi)溶劑揮發(fā)。
六、注意事項
1)Ultimate®XB-C18 色譜柱使用 pH 范圍在 1.5~10.0,通常建議使用范圍 pH 為 2.0~8.0 比較合適,流動相超出pH 范圍將會導(dǎo)致硅膠基質(zhì)流失和鍵合相 斷裂使柱效下降,使用壽命變短,所以要嚴(yán)格控制pH 范圍;
2)Ultimate®XB-C18 色譜柱使用流動相中有機溶劑比例要求在5%以上,如果有機相過低,易導(dǎo)致“相塌陷",使保留時間、分離度等不能重現(xiàn)。
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