目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學(xué)試劑>>溶液>> 單細(xì)胞裂解液(DNA 專用)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1mL |
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貨號 | XY-D-1809 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | Single Cell Lysis Solution for DNA |
保存條件 | -20℃ | 有效期 | 1年 |
產(chǎn)品簡介:
單細(xì)胞裂解液(DNA 專用)是單細(xì)胞 DNA 檢測專用裂解液。
產(chǎn)品特點:
1.快速裂解單個細(xì)胞。
2.可有效抑制 DNase 在裂解過程中對 DNA 的破壞,維持 DNA 的穩(wěn)定性。
3.裂解物可以直接用于測序和 PCR 等后續(xù)試驗。
4.本產(chǎn)品足夠至少 200 次單細(xì)胞裂解實驗。
5.本產(chǎn)品只能用于科研。
產(chǎn)品參數(shù):
成份規(guī)格包裝
單細(xì)胞裂解液(DNA 專用)1 mL1.5 mL 本色管
使用手冊1 份無
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。
自備試劑
待處理樣品,液體細(xì)胞培養(yǎng)基,PBS 溶液,卵裂球及囊胚單細(xì)胞制備試劑盒(可從本公司另購)
使用方法:
如何制備單個細(xì)胞取決于實驗樣品和實驗者所擁有的儀器設(shè)備,此處所列步驟僅針對培養(yǎng)細(xì)胞、實體組織、淋巴細(xì)胞和卵裂球(2-8 細(xì)胞胚胎)等材料,對其他材料(如干細(xì)胞克隆、胚囊、胚胎組織等),用戶需自行選用合適的方法制備單細(xì)胞。對已經(jīng)處于單細(xì)胞懸浮狀態(tài)的細(xì)胞(如 FACS 分離細(xì)胞、卵細(xì)胞等), 則可以跳過制備過程而直接進(jìn)入單細(xì)胞裂解步驟:
一、用培養(yǎng)細(xì)胞或?qū)嶓w組織制備單細(xì)胞:
1.按常規(guī)胰-酶方法處理培養(yǎng)細(xì)胞或組織,將細(xì)胞重懸于自備的液體細(xì)胞培養(yǎng)基中。
2.按常規(guī)方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)。
3.轉(zhuǎn)移 100-4000 個細(xì)胞到新離心管中,400 g 離心 4 分鐘沉淀細(xì)胞,小心棄上清(培養(yǎng)基)。
4.將細(xì)胞沉淀重懸于 50 ?L 自備PBS 溶液中,使其終濃度為 2-80 個細(xì)胞/?L。
5.在干凈的培養(yǎng)皿上點加數(shù)個含 5 ?L 的 PBS 溶液小液滴,加入 5 ?L 細(xì)胞懸浮液到第一個小液滴中,然后再從第一個小液滴中轉(zhuǎn)移 5 ?L 到第二個小液滴,如此系列稀釋樣品數(shù)次,使得其濃度接近每 2.5 ?L 液體中含 1 個細(xì)胞, 放冰上待用。
二、用卵裂球或囊胚制備單個細(xì)胞
(具體方法參考卵裂球及囊胚單細(xì)胞制備試劑盒手冊)
三、用單細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞
6.在顯微鏡下用顯微注射儀取 2.5 ?L 樣品,確認(rèn)含一個細(xì)胞后,將其轉(zhuǎn)移到一個含 2.5 ?L 單細(xì)胞裂解液的PCR 管中。最好同時設(shè)置無樣品的陰性對照
(2.5 ?L 樣品中不含細(xì)胞)。
7.在 2.5 ?L 樣品中,顯微鏡下細(xì)胞懸液可直接用于單細(xì)胞裂解反應(yīng)。
8.裂解后可以放冰上待用,如果長期不用,可以放-80℃保存。四、單細(xì)胞裂解物的 PCR 擴(kuò)增
9.細(xì)胞裂解物從-80℃中取出后,65℃保溫 10 分鐘,取出后放冰上待用。
10.以一半或全部上步操作得到的細(xì)胞裂解物為模板,按常規(guī)方法進(jìn)行 PCR 反應(yīng)。
選擇我們的單細(xì)胞裂解液(DNA 專用),就是選擇精準(zhǔn)、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護(hù)航!
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