目錄:上海烜雅生物科技有限公司>>分子生物學試劑>>清除劑>> 植物DNA純化試劑盒(過柱法)
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50次 |
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貨號 | XY-D-1721 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
主要用途 | 科研 | 英文名稱 | / |
保存條件 | 常溫 | 有效期 | 1年 |
產品簡介:
本產品是柱式植物基因組 DNA 提取產品,可以用于多種植物基因組 DNA(含葉綠體和線粒體 DNA)的快速提取。
產品特點:
1.純度高,不含污染和抑制劑,可以直接用于酶切、PCR、real-time PCR、multiplex PCR、RAPD、RFLP、AFLP、Southern Blotting, microsatellite analysis 等各種后續(xù)分子生物學實驗。
2.產率一般在 3-30 ug/100 mg 樣品。OD260/280 一般在 1.8 以上。DNA 片段長度一般在 40-50 Kb 左右。
3.適用范圍廣,可以使用于絕大多數(shù)植物的各種組織。
4.不會發(fā)生離心柱堵塞現(xiàn)象。
5.植物DNA純化試劑盒(過柱法)足夠 50 次微量提取。
產品參數(shù):
成份 規(guī)格包裝
植物 DNA 純化溶液 A 40 mL60mL 本色瓶
植物 DNA 純化溶液 B 20 mL30mL 本色瓶
植物 DNA 純化溶液 C 50 mL60mL 本色瓶
離心吸附柱 50 套塑料袋
通用洗柱液 50 mL60mL 本色瓶
DNA 洗脫液
(基因組純化專用) 10 mL10mL 本色瓶
使用手冊 1 份無
運輸及保存
常溫運輸和保存,有效期一年。
自備試劑
氯仿。
使用方法:
注意:植物 DNA 純化溶液 A 和植物 DNA 純化溶液 B 容易產生沉淀,植物 DNA 純化溶液 B 比較粘稠,用前均需要放置在 65℃預熱使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分搖勻。
1.65℃預熱植物 DNA 純化溶液 A,待其沉淀溶化后,充分混勻,取 0.75 mL 加入到 10 mL 塑料離心管中并放置于 65℃待用。
2.稱取植物組織 0.1-0.5 g 左右,剪成微小的碎片,加入到有植物 DNA 純化溶液 A 的 10 mL 塑料離心管中并短暫勻漿。也可以液氮研磨后將粉末加入到管中(建議不要在陶器或玻璃研缽中破碎細胞,因為二氧化硅會非特異地吸附 DNA,降低 DNA 回收量。但可以在塑料研缽中研磨)。勻漿過程中將產生大量泡沫,屬于正?,F(xiàn)象。
3.將勻漿液(包括植物碎片)全部轉移到新的 1.5 mL 塑料離心管(此時勻漿液較為粘稠,可將槍頭剪去一截后轉移上清, 不能吸取的植物碎片可以小心倒入)。
4.在勻漿液中加入 0.5 倍體積預熱的植物 DNA 純化溶液 B 到離心管中,顛倒數(shù)次混勻。此時溶液中可能有白色絲狀懸浮物產生。(由于溶液 B 比較粘稠,可以將 1 mL 槍頭剪去一截再吸?。?/p>
5.65℃水浴 3-5 分鐘。如果室溫放置,DNA 產量會降低 10-20%。
6.如果需要得到比較純凈的 DNA,可以選擇需要氯仿的操作:加入 200 uL 自備氯仿,震蕩混勻 10-30 秒,此時溶液將呈乳白色。12,000×g 室溫離心 2 分鐘。此時上清液將變得透明,中間層有白膜。小心轉移上清液到一個新的 1.5 mL 塑料離心管中,避免觸及中間層的白膜。然后加入 1.5 倍體積的植物 DNA 純化溶液 C, 顛倒混勻后全部轉移到離心吸附柱中,室溫放置至少 2 分鐘。然后進入第 8 步。
7.如果選擇不需要氯仿的操作(得到的 DNA 純度較低),則直接在水浴后的裂解液中 1.5 倍體積的植物 DNA 純化溶液 C,顛倒混勻后全部轉移到離心吸附柱中,室溫放置至少 2 分鐘。然后進入第 8 步。
8.12,000×g 室溫離心 1 分鐘,DNA 將吸附在離心吸附柱的膜上,倒棄收集管中的穿透液。
9.將 0.5 mL 通用洗柱液加入離心柱中,12,000×g 室溫離心 1 分鐘,棄穿透液。
10.重復上步操作一次。
11.空甩半分鐘去除殘留液體,將離心吸附柱轉移到新的 1.5 mL 離心管中。
12.將離心吸附柱放置在一新的 1.5mL 塑料離心管中,加 50-100 uL DNA 洗脫液
(基因組純化專用),室溫放置 3-5 分鐘。
13.12,000×g 室溫離心 1 分鐘即得植物 DNA 溶液。
14.由于本產品使用的離心吸附柱吸附 DNA 的能力較強,可以重復上步操作一次,以洗脫得到更多的 DNA。
15.直接取 5-10 uL 電泳檢測 DNA,其余放冰箱備用。
選擇我們的植物DNA純化試劑盒(過柱法),就是選擇精準、高效、可靠的檢測方案,為您的科研實驗保駕護航!