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上海語(yǔ)純生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員·1年EC96311Ar A4感受態(tài)（電轉(zhuǎn)）
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- EC96311 產(chǎn)品型號(hào)
- 語(yǔ)純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：40更新時(shí)間：2025-04-24 12:59:42
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×50ul/100×50ul |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | EC96311 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號(hào)：EC96311
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×50ul/100×50ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
Ar A4感受態(tài)（電轉(zhuǎn)）
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
發(fā)根農(nóng)桿菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)農(nóng)桿菌屬(agrobacterium)的一種革蘭氏陰性土壤細(xì)菌，它能夠
感染 大多數(shù)雙子葉植物和少數(shù)單子葉植物以及個(gè)別裸子植物。Ar.A4 發(fā)根農(nóng)桿菌菌株含有農(nóng)桿堿型
Ri 質(zhì)粒，具有廣泛的宿主范圍（玉米，煙草，胡蘿卜，甘草等），同時(shí)具有卡那霉素抗性。本公
司生產(chǎn)的 Ar.A4 化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pK7WGF2 質(zhì)粒（壯觀霉素抗性）檢測(cè)，轉(zhuǎn)
化效率>105 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Ar.A4
電轉(zhuǎn)感受態(tài)細(xì)胞
10 ×100 μL
100 ×100μL
定制
基因型：Agrobacterium rhizogenes(kanR ) Ar A4 Ri(agropine type)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存; 請(qǐng)勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無(wú)外源質(zhì)粒 DNA 殘留
電轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)化效率≥105 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 0.1 cm 電擊杯和杯蓋從儲(chǔ)存液中拿出倒置于干凈的吸水紙上 5 分鐘，待其瀝干水分，正置 5 分鐘，使
乙醇充分揮發(fā)，待乙醇揮發(fā)干凈立即插入冰中，壓實(shí)冰面，電極杯頂離冰面 0.5 cm 以方便蓋上杯蓋，冰
中靜置 5 分鐘充分降溫。
2. 取-80℃保存的農(nóng)桿菌感受態(tài)插入冰中 5分鐘，待其融化，加入 0.01-1 μg質(zhì)粒 DNA（體積不大于 6ul），
用手撥da管底混勻，立即插入冰中，用200 μl槍頭將感受態(tài)-質(zhì)粒混合物快速移到電擊杯中，蓋上杯蓋，
空管保留待用。
3. 啟動(dòng)電轉(zhuǎn)儀，設(shè)置參數(shù)：C=25 μF，PC=200 ohm，V=2400 V（此參數(shù)為 Biorad 推薦，使用者也可按
所用電轉(zhuǎn)儀推薦的 protocol 操作），將電擊杯快速放入電轉(zhuǎn)槽中，電擊完成快速插入冰中，加入 900 μl
無(wú)抗生素的 LB 并轉(zhuǎn)移到感受態(tài)空管中，28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時(shí)。
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 LB 或 YEB
平板上，倒置放于 28℃培養(yǎng)箱培養(yǎng) 2-3 天（當(dāng)平板只含有 50 μg/ml kan 時(shí)，28℃培養(yǎng) 48 h 即可；平板中
同時(shí)加入 50 μg/ml kan，20 μg/ml rif 時(shí)，需 28℃培養(yǎng) 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml rif 則需要 28℃
培養(yǎng) 72-90 h）。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過(guò)感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 利福平濃度不應(yīng)高于 25ug/ul，過(guò)高的利福平濃度不利于農(nóng)桿菌生長(zhǎng)，會(huì)降低其生長(zhǎng)速度和轉(zhuǎn)化效率。
4. Ar.A4 具有卡那霉素抗性，不可用于具有卡那霉素抗性質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化。
Ar A4感受態(tài)（電轉(zhuǎn)）
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