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上海語純生物科技有限公司
初級會員·1年CC96306EHA101感受態(tài)
| 參考價: | 面議 |
具體成交價以合同協(xié)議為準- CC96306 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：38更新時間：2025-04-24 09:42:14
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96306 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號：CC96306
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
EHA101感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
EHA101菌株為C58型背景，核基因中含有篩選標(biāo)簽——利福平抗性基因Rif，為了便于轉(zhuǎn)化操作，
此菌株攜帶一無自身轉(zhuǎn)運功能的胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA101 (pTiBo542DT-DNA)，此質(zhì)粒含有 vir 基
因 (vir 基因是 T-DNA 插入植物基因組必需的元件，pEHA101 (pTiBo542DT-DNA)質(zhì)粒自身的 T
DNA 轉(zhuǎn)移功能被破壞，但可以幫助轉(zhuǎn)入的雙元載體 T-DNA 順利轉(zhuǎn)移)。pEHA101 (pTiBo542DT
DNA) 型 Ti 質(zhì)粒含有篩選標(biāo)簽：Kan，賦予 EHA101 菌株和卡那霉素抗性，適用于玉米、水稻、煙
草等植物的轉(zhuǎn)基因操作。本公司生產(chǎn)的 EHA101 化學(xué)轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，pK7WGF2
質(zhì)粒（壯觀霉素抗性）檢測轉(zhuǎn)化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
EHA101
化學(xué)感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：C58 (RifR) Ti pEHA101 (pTiBo542 D T-DNA) (KanR) Nopaline
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除胭脂堿型 Ti 質(zhì)粒 pEHA101 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥ 104 cfu/μg DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，在手心融化成冰水混合物，置于冰水浴中；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μl 感受態(tài)細胞中，用手剝打管底混勻，依次于冰上靜置 10 分鐘、液氮 5 分
鐘（或干冰乙醇浴和-80℃冰凍）、37℃水浴 5 分鐘、冰浴 5 分鐘；
3.加入 900 μl 無抗生素的 YEB 液體培養(yǎng)基，于 28℃振蕩培養(yǎng) 2~3 小時；
4. 6000 rpm 離心一分鐘收菌，留取 100 μl 左右上清輕輕吹打重懸菌塊涂布于含相應(yīng)抗生素的 YEB 平板
上，倒置放于28 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)2-3天（當(dāng)平板只含有轉(zhuǎn)化所用雙元載體抗生素時，28 ℃培養(yǎng)48 h即可；
平板中同時加入雙元載體抗生素，20 μg/ml Rif 時，需 28℃培養(yǎng) 60 h；如果使用的平板含有 50 μg/ml Rif
則需要 28℃培養(yǎng) 72-90 h）。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 利福平濃度不應(yīng)高于 25 μg/μl，利福平濃度過高不利于農(nóng)桿菌生長，會降低其生長速度和轉(zhuǎn)化效率。
4. 由于 Ti 質(zhì)粒丟失的概率極低（可以忽略），所以相關(guān)抗性基因可以不用添加。
EHA101感受態(tài)
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