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CC96163EPI300 感受態(tài)
參考價: | 面議 |
- CC96163 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):34更新時間:2025-04-23 10:32:33
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產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
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貨號 | CC96163 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號:CC96163
產(chǎn)品規(guī)格:10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學研究或進一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
EPI300 感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
EPI300 細胞含有一個突變的 trfA 基因,該基因表達出的蛋白產(chǎn)物可以促進含有 oriV 復制子的質(zhì)粒的高拷
貝擴繁,誘導劑Ⅰ可以誘導 trfA 基因的表達。當含有 oriV 復制子質(zhì)粒的 EPI300 細胞在 LB/2YT 或 SOB 培
養(yǎng)基中生長時,trfA 基因的表達被抑制,oriV 復制子質(zhì)粒的拷貝數(shù)維持在很低的水平;當在培養(yǎng)基中加入
CopyMore 300 誘導劑時,oriV 復制子質(zhì)粒的拷貝數(shù)可維持在很高的水平,提高了質(zhì)粒產(chǎn)量。因此,
EPI300 菌株可以降低 oriV 復制子質(zhì)粒的拷貝數(shù),特別適合于各種不穩(wěn)定 DNA 或毒性基因的克隆。 [mrr
hsdRMS-mcrBC]基因型使 EPI300 菌株適合于克隆富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA(例如:哺乳動物
基因組 DNA)。recA1 和 endA1 的突變有利于插入 DNA 的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒 DNA 的提取。lacZΔM15 標
記的存在使 EPI300 可用于藍白斑篩選,rpsL 賦予其鏈霉素抗性。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測,EPI300 感受態(tài)
細胞的轉(zhuǎn)化效率可達 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
EPI300
化學感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F – mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galU galK λ– rpsL nupG
trfA dhfr
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90 s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞,僅用手指輕彈即可;
EPI300 感受態(tài)
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