NobleRyder BC2568過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產(chǎn)品貨號：BC2568

產(chǎn)品名稱：過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產(chǎn)品規(guī)格：50T/24S

過氧化氫酶CAT活性檢測試劑盒鉬酸銨法抗逆

產(chǎn)品簡介：

中文名稱：過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法）

英文名稱：Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

規(guī)格：50T/24S

檢測方法：可見分光光度法 Spectrophotometer

儲存條件：Store at 2-8℃，6 months

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說明書的參數(shù)為準

NobleRyder BC2568過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method）

產(chǎn)品說明:

CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，是最主要的H₂O₂清除酶，在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。

H₂O₂可與鉬酸銨反應(yīng)形成穩(wěn)定的黃色復(fù)合物，在405nm處有強烈吸收峰，且其吸光值大小與過氧化氫濃度成

正比。通過測定反應(yīng)體系中剩余的H₂O₂量，得出被CAT催化分解的H₂O₂量，進而反映CAT的活性。

注意：實驗之前建議選擇2-3個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、恒溫水浴鍋、1mL玻璃比色皿、研缽/勻漿器/細胞超聲破碎儀、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、樣本處理(可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻)

1、細菌、細胞或組織樣本的制備:

a、細菌或培養(yǎng)細胞:收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清:按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液，超聲波破碎細菌或細胞(功率200W，超聲3s，間隔9s，重復(fù)30次):8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

b、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(V)=1:5~10(建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液)進行冰浴勻漿。8000g，4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清(漿)樣本：直接檢測。

二、測定步驟

分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至405nm，蒸餾水調(diào)零。

1、測定前將20μmol/mL標準品與試劑一在25C水浴10min以上。

三、CAT活性計算

1、血清(漿)CAT活力的計算:

單位的定義:在25℃條件下，每mL血清(漿)每分鐘催化1μmolH₂O₂降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/mL)= (△A÷△A標準)x20xV標準+V樣+TxF=10x(△A+△A標準)xF

2、組織、細菌或細胞中CAT活力計算:

1)按樣本蛋白濃度計算:

單位的定義:在25℃條件下，每mg組織蛋白每分鐘催化1μmol H₂O₂降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/mg prot)=(△A+△A標準)x20xV標準+(CprxV樣) +TxF=10x(AA÷AA標準)÷CprxF

2)按樣本質(zhì)量計算:

單位的定義:在25℃條件下，每g組織每分鐘催化1μmol H₂O₂降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/g質(zhì)量)=(△A+△A標準)x20xV標準+(V 樣+V 樣總xW) +TxF=10x(△A+ΔA標準) ÷WxF

3)按細菌或細胞數(shù)量計算:

單位的定義:在25℃條件下，每1萬個細菌或細胞每分鐘催化1μmol H₂O₂降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/104cell)= (△A÷△A標準)x20xV標準+(V樣+V樣總x500)+TxF=0.02x(△A÷△A標準)xF

20:標準品濃度，20μmol/mL:V標準:加入標準品體積，0.3mL:V樣:加入樣本體積，0.06mL:T:反應(yīng)時間，10min:F:樣本稀釋倍數(shù):Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL;V樣總:加入提取液體積，1mL:W:樣本質(zhì)量，g;500:細胞或細菌總數(shù)，500萬。

注意事項:

1.本試劑盒多給出25mL的提取液，供樣本稀釋使用。

2.如果反應(yīng)液有大量氣泡產(chǎn)生，將樣本用提取液稀釋后再進行測定。

3.如果樣本量過多，為保證反應(yīng)時間(25℃，10min)的準確性，建議分成若干批次檢測，每批次檢測均需配1-2個空白管與標準管。

4.當A測定小于0.12或者約等于A對照時，建議將樣本用提取液稀釋后再進行測定。

5.動物組織如肝臟、腎臟等酶活性較高樣本，預(yù)實驗建議將樣本用提取液多個高倍稀釋(如25倍、50倍、100倍等)試驗后，再進行檢測。

過氧化氫酶CAT活性檢測試劑盒鉬酸銨法抗逆 

產(chǎn)品訂購信息：

BC2568過氧化氫酶（CAT）活性檢測試劑盒（鉬酸銨法) Catalase (CAT) Activity Assay Kit （Ammonium Molybdate-Chromogenic Method） 50T/24S