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杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司
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一、引言
隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）已成為基因表達(dá)分析、病原體檢測(cè)、SNP 分型、拷貝數(shù)變異等研究和臨床診斷的重要工具。羅氏（Roche）生產(chǎn)的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀以其穩(wěn)定的溫度控制系統(tǒng)、靈敏的熒光探測(cè)模塊以及完善的軟件平臺(tái)而獲得廣泛認(rèn)可。本文圍繞一臺(tái)二手羅氏實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀，從設(shè)備概覽、主要性能、技術(shù)優(yōu)勢(shì)、典型應(yīng)用、操作維護(hù)、使用案例和售后支持等方面進(jìn)行詳細(xì)介紹。
二、設(shè)備概覽
二手羅氏實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀保留了原廠出廠時(shí)的全部核心組件，采用了模塊化設(shè)計(jì)。儀器外觀結(jié)構(gòu)與全新機(jī)型一致，由機(jī)箱主機(jī)、光學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)、觸摸屏控制單元以及配套電源組成。主機(jī)內(nèi)部包括精準(zhǔn)的熱循環(huán)模塊和多通道熒光探測(cè)器，可支持 FAM、HEX/VIC、ROX、Cy5 等常見熒光染料。配合羅氏專用軟件，可一次性檢測(cè)多達(dá) 96 個(gè)樣本，每個(gè)樣本可進(jìn)行 1–5 個(gè)通道的數(shù)據(jù)采集與分析。
三、主要性能參數(shù)
溫控精度： ±0.1 ℃；
溫度均一性： ≤ 0.3 ℃；
升降溫速率： 5 ℃/s（從 60 ℃ 到 95 ℃）；
光學(xué)通道： 4 通道；
檢測(cè)靈敏度： 可檢出單拷貝水平的核酸；
通量： 96 孔板，支持半板、條管以及單管檢測(cè)；
重復(fù)性： Ct 值標(biāo)準(zhǔn)差 ≤ 0.1；
數(shù)據(jù)輸出： CSV、PDF、Excel、圖表等多種格式；
軟件功能： 定性/定量分析、熔解曲線分析、相對(duì)定量、絕對(duì)定量、SNP 分型等。
四、技術(shù)優(yōu)勢(shì)
精確溫控系統(tǒng)
采用雙閉環(huán) PID 算法，實(shí)時(shí)監(jiān)控模塊溫度，保證反應(yīng)過程中溫度偏差最小化；
多點(diǎn)溫度反饋設(shè)計(jì)，自動(dòng)校準(zhǔn)溫差，增強(qiáng)檢測(cè)重復(fù)性。
多通道熒光檢測(cè)
光電探測(cè)器靈敏度高，自動(dòng)背景扣除，信噪比達(dá) 1:1000；
通道切換速度快，熒光信號(hào)采集時(shí)延低于 10 ms。
軟件平臺(tái)
界面簡潔；反應(yīng)設(shè)置向?qū)Щ瑴p少操作失誤；
支持直觀的實(shí)時(shí)擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線及熔解曲線分析；
內(nèi)置多種分析模板，可自定義報(bào)告內(nèi)容及格式。
模塊化設(shè)計(jì)
可更換光源燈泡與探測(cè)器模塊，維修時(shí)無需更換整機(jī)；
通用電源接口，適應(yīng)寬電壓環(huán)境。
五、典型應(yīng)用場(chǎng)景
基因表達(dá)定量
利用熒光標(biāo)記引物或探針，精準(zhǔn)評(píng)估基因在不同組織或處理?xiàng)l件下的表達(dá)差異；
病原體快速檢測(cè)
新冠病毒、流感病毒、結(jié)核分枝桿菌等病原微生物的定性與定量檢測(cè)；
轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)
檢測(cè)樣本中轉(zhuǎn)基因片段的存在與數(shù)量；
SNP 分型與拷貝數(shù)變異
配合特異性探針，實(shí)現(xiàn)單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)分型與拷貝數(shù)差異檢測(cè)；
臨床診斷與科研
腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、脫氧核糖核酸甲基化分析、miRNA 表達(dá)譜研究等。
六、操作與維護(hù)
日常開機(jī)檢查
檢查電源線與機(jī)箱接口是否緊固；
打開軟件，查看系統(tǒng)自檢結(jié)果；
試劑和耗材
建議使用羅氏或經(jīng)授權(quán)的兼容品牌試劑盒；
96 孔板、光學(xué)封板膜應(yīng)選用低熒光漂白材料；
日常清潔
定期用 70% 乙醇清潔樣本架與蓋板；
光學(xué)窗口每月檢查一次，如有塵埃用專業(yè)鏡頭紙擦拭；
定期校準(zhǔn)
建議每半年進(jìn)行溫度與熒光系統(tǒng)校準(zhǔn)；
可聯(lián)系專業(yè)技術(shù)服務(wù)商或?qū)嶒?yàn)室內(nèi)部質(zhì)控組執(zhí)行；
故障處理
軟件出現(xiàn)異常時(shí)，可重啟主機(jī)或重新安裝軟件；
硬件報(bào)警提示時(shí)，可參考說明書或聯(lián)系售后支持。
七、二手設(shè)備驗(yàn)收要點(diǎn)
外觀檢查： 無明顯磕碰、劃痕；機(jī)箱固定螺絲完好；
溫控測(cè)試： 可通過標(biāo)準(zhǔn)試劑盒或 DNA Ladder 驗(yàn)證升降溫速率及均一性；
熒光靈敏度測(cè)試： 使用低濃度熒光標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)信號(hào)變化曲線；
軟件運(yùn)行： 載入模板、編輯程序、導(dǎo)出報(bào)告功能正常；
質(zhì)保與配件： 確認(rèn)賣方提供的質(zhì)保期限、電源線、通信線、光學(xué)封板膜等附件是否齊全。
八、典型用戶案例
高?？蒲袑?shí)驗(yàn)室
某大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院購入此機(jī)型，用于多部門聯(lián)合項(xiàng)目，平均每周運(yùn)行 20 次以上，設(shè)備穩(wěn)定運(yùn)行超過兩年，Ct 值重現(xiàn)性良好。第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)
某檢測(cè)中心作為二手回購機(jī)型，引入用于食品安全微生物檢測(cè)，月均通量可達(dá) 500 板次，高通量檢測(cè)任務(wù)下表現(xiàn)出色。臨床檢驗(yàn)室
地市級(jí)醫(yī)院分子實(shí)驗(yàn)室使用該儀器開展呼吸道病毒核酸監(jiān)測(cè)，并通過 ISO/IEC 17025 認(rèn)證審核。
九、質(zhì)量保證與售后支持
質(zhì)保范圍
核心部件（熱循環(huán)模塊、光學(xué)模塊）承諾 6 個(gè)月質(zhì)保；
其他配件質(zhì)保 3 個(gè)月，質(zhì)保期內(nèi)免費(fèi)更換損壞部件；
技術(shù)培訓(xùn)
提供儀器安裝、使用和日常維護(hù)培訓(xùn)；
包含軟件操作與常見故障排查指導(dǎo)；
遠(yuǎn)程支持
配備遠(yuǎn)程診斷軟件，可實(shí)時(shí)監(jiān)控儀器運(yùn)行狀態(tài)；
一線工程師在線解答及指導(dǎo)；
現(xiàn)場(chǎng)服務(wù)
在簽署服務(wù)協(xié)議后，48 小時(shí)內(nèi)安排工程師上門服務(wù)（限國內(nèi)主要城市）；
提供定期保養(yǎng)與校準(zhǔn)服務(wù)套餐。
十、總結(jié)
二手羅氏實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀憑借其精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng)、靈敏的熒光檢測(cè)能力和完善的軟件分析平臺(tái)，能夠滿足科研、臨床及第三方檢測(cè)等多種需求。在保證儀器性能的前提下，二手采購不僅節(jié)省投入成本，也可快速上機(jī)開展實(shí)驗(yàn)。通過嚴(yán)格的驗(yàn)收流程、規(guī)范的日常維護(hù)及完善的售后服務(wù)，使用者可確保長期穩(wěn)定運(yùn)行，為科研與生產(chǎn)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。
