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二手羅氏 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀詳盡介紹
一、引言
在分子生物學(xué)和臨床診斷領(lǐng)域，實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）技術(shù)以其靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、可重復(fù)性強(qiáng)等特點(diǎn)，成為核酸定量分析的主流方法之一。羅氏公司推出的 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀是適用于中高通量檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備。隨著二手科研設(shè)備流通市場(chǎng)的成熟，該型號(hào)的二手儀器因其穩(wěn)定的性能和合理的價(jià)格，在科研、教學(xué)與第三方檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室中仍具有較高使用價(jià)值。
本文將從系統(tǒng)組成、技術(shù)參數(shù)、功能特點(diǎn)、典型應(yīng)用、使用維護(hù)及選購建議等方面，全面介紹二手羅氏 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的相關(guān)信息。
二、系統(tǒng)組成
二手 LightCycler® 480 II 系統(tǒng)主要包括以下幾個(gè)組成部分：
主機(jī)（熱循環(huán)系統(tǒng)與光學(xué)系統(tǒng)集成）
搭載精確溫控模塊和多通道熒光檢測(cè)系統(tǒng)，支持不同孔板類型。樣本處理組件
包括反應(yīng)板托盤、96孔或384孔反應(yīng)板、透明密封膜、離心適配器等。控制與分析軟件
LightCycler® 軟件（版本依儀器出售年份而定），用于實(shí)驗(yàn)設(shè)置、數(shù)據(jù)采集、熔解曲線分析等。附件與外設(shè)
如計(jì)算機(jī)工作站、電源線、USB接口電纜及光學(xué)校準(zhǔn)片等。
三、技術(shù)參數(shù)
| 項(xiàng)目 | 技術(shù)指標(biāo) |
|---|---|
| 孔板類型 | 96孔、384孔反應(yīng)板 |
| 熒光檢測(cè)通道 | 支持最多6色熒光通道 |
| 溫控范圍 | 37 °C – 99 °C |
| 升降溫速率 | 最快可達(dá) 4.8 °C/秒 |
| 孔間溫度均一性 | ±0.2°C（96孔），±0.4°C（384孔） |
| 檢測(cè)靈敏度 | 可檢測(cè)1~5個(gè)拷貝的DNA模板 |
| 支持染料 | SYBR Green I, TaqMan, MGB, FRET, Molecular Beacon等 |
| 分析功能 | Ct分析、相對(duì)定量、絕對(duì)定量、基因分型、HRM熔解分析等 |
| 軟件系統(tǒng) | LightCycler® 軟件（具體版本取決于原始配置） |
四、功能特點(diǎn)（以實(shí)際使用表現(xiàn)為基礎(chǔ)）
1. 熱循環(huán)性能穩(wěn)定
采用高效的銀質(zhì)加熱模塊與熱電制冷技術(shù)，控溫迅速、穩(wěn)定，在多孔反應(yīng)板中實(shí)現(xiàn)良好的溫度一致性。這一點(diǎn)對(duì)熒光定量PCR反應(yīng)的重復(fù)性和可信度至關(guān)重要。
2. 多通道熒光檢測(cè)
系統(tǒng)最多支持六種熒光信號(hào)的同時(shí)檢測(cè)，便于多重PCR反應(yīng)開展，可在單次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因靶標(biāo)，提高實(shí)驗(yàn)效率。
3. 靈活的軟件分析平臺(tái)
軟件支持?jǐn)?shù)據(jù)實(shí)時(shí)采集、擴(kuò)增曲線展示、Ct值分析、標(biāo)準(zhǔn)曲線生成、熔解曲線比對(duì)、基因型分型、SNP分析等，用戶可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇不同的分析模塊。
4. 可適應(yīng)多種實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)
該設(shè)備支持常規(guī)定量PCR、端點(diǎn)法定量、熔解曲線分析、高分辨率熔解（HRM）分析等，覆蓋從基因表達(dá)分析到單核苷酸多態(tài)性檢測(cè)（SNP）的多種研究需求。
五、典型應(yīng)用場(chǎng)景
1. 基礎(chǔ)生命科學(xué)研究
mRNA 表達(dá)量定量分析
轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究
siRNA 敲減效應(yīng)驗(yàn)證
2. 醫(yī)學(xué)與臨床研究
腫瘤相關(guān)基因突變檢測(cè)
傳染病病原體核酸定量分析
遺傳病檢測(cè)（如BRCA1/2突變、地中海貧血等）
3. 藥物篩選與毒理學(xué)評(píng)價(jià)
藥物誘導(dǎo)的基因表達(dá)變化監(jiān)測(cè)
細(xì)胞模型中藥效靶點(diǎn)基因分析
4. 食品與環(huán)境監(jiān)測(cè)
轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè)
食源性病原菌如沙門氏菌、大腸桿菌的快速檢測(cè)
水體或土壤中微生物負(fù)荷監(jiān)測(cè)
六、購買二手設(shè)備的優(yōu)勢(shì)與風(fēng)險(xiǎn)提示
優(yōu)勢(shì)：
成本節(jié)約：價(jià)格相較新機(jī)大幅降低，可顯著減少實(shí)驗(yàn)室預(yù)算支出。
性能依舊可靠：若原機(jī)使用規(guī)范、定期維護(hù)，核心部件（如熱模塊與光學(xué)系統(tǒng)）性能仍然穩(wěn)定。
快速部署：無需預(yù)定等待制造周期，交貨與上線周期短。
風(fēng)險(xiǎn)與注意事項(xiàng)：
使用壽命評(píng)估：應(yīng)核實(shí)機(jī)器使用年限與通電時(shí)間，部分老舊設(shè)備需注意光源老化與溫控漂移問題。
通道校準(zhǔn)：確保所有熒光通道功能正常，校準(zhǔn)數(shù)據(jù)是否隨設(shè)備附帶提供。
軟件兼容性：需確認(rèn)舊版軟件能否安裝在當(dāng)前操作系統(tǒng)中，必要時(shí)需搭配老款工作站。
售后與配件：需明確二手設(shè)備是否提供技術(shù)支持與配件保障，或需額外采購標(biāo)準(zhǔn)化組件。
七、使用與維護(hù)建議
1. 操作建議
使用原廠推薦的反應(yīng)板與封膜，避免因耗材不兼容而影響檢測(cè)精度。
建議進(jìn)行陰性對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)曲線、重復(fù)孔布置等以驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性。
定期運(yùn)行光學(xué)檢測(cè)和溫控驗(yàn)證程序，確保信號(hào)準(zhǔn)確。
2. 日常維護(hù)
每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清理孔板托盤區(qū)域，避免熒光污染物積累。
避免液體泄漏造成內(nèi)部腐蝕，實(shí)驗(yàn)區(qū)建議設(shè)置防溢托盤。
每6~12個(gè)月進(jìn)行一次專業(yè)校準(zhǔn)和系統(tǒng)檢測(cè)，延長(zhǎng)儀器壽命。
八、結(jié)語
羅氏 LightCycler® 480 II 實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀自推出以來，一直被廣泛應(yīng)用于多學(xué)科分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。其穩(wěn)定的性能、多樣的檢測(cè)能力與兼容性使其在二手市場(chǎng)中仍具使用價(jià)值。通過規(guī)范操作與合理維護(hù)，二手設(shè)備可繼續(xù)支持科研項(xiàng)目與檢測(cè)任務(wù)，為用戶提供可靠的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)。
對(duì)于預(yù)算有限、或作為教學(xué)與初步研究使用的實(shí)驗(yàn)室來說，選購一臺(tái)狀態(tài)良好的二手 LightCycler® 480 II 是具有性價(jià)比的選擇。若搭配完善的技術(shù)支持與數(shù)據(jù)分析方案，該設(shè)備仍可在未來多年內(nèi)持續(xù)發(fā)揮作用。
