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賽默飛微量紫外分光光度計(jì)介紹
一、引言
在分子生物學(xué)、生命科學(xué)、臨床研究等實(shí)驗(yàn)場景中,樣品常常較為珍貴,特別是在處理微量核酸、蛋白質(zhì)樣品時(shí),對檢測靈敏度和樣品體積要求較高。為滿足這類應(yīng)用需求,賽默飛推出了微量紫外分光光度計(jì),其適用于小體積樣品的快速定量分析,尤其適用于DNA、RNA、蛋白質(zhì)等生物大分子的濃度測定和純度評估。
二、工作原理
該類分光光度計(jì)基于紫外/可見光區(qū)域的吸收光譜原理工作,通常利用比爾-朗伯定律(Beer-Lambert Law)進(jìn)行定量分析。通過測量溶液對某一特定波長光的吸收強(qiáng)度,可計(jì)算出溶液中溶質(zhì)的濃度。微量紫外分光光度計(jì)在光路設(shè)計(jì)上采用短光程的固定光路(一般為0.2~1.0 mm),從而適應(yīng)1–2 µL樣品量的檢測,同時(shí)提高檢測靈敏度。
三、儀器組成與結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)
賽默飛微量紫外分光光度計(jì)的基本組成包括以下幾個(gè)部分:
光源系統(tǒng):通常配備氘燈和鎢燈,分別提供紫外光(190–360 nm)與可見光(360–850 nm);
微量比色模塊:采用石英平臺或?qū)S梦⒘繖z測頭,無需比色皿,直接滴加樣品;
檢測器:一般使用光電二極管陣列,能夠同時(shí)采集多波長數(shù)據(jù),提高測量速度;
操作界面:配備彩色觸控屏,支持獨(dú)立操作或通過電腦軟件控制;
數(shù)據(jù)處理與存儲:內(nèi)置分析程序,支持結(jié)果自動(dòng)生成并導(dǎo)出為多種格式;
校準(zhǔn)與維護(hù)模塊:部分型號內(nèi)置自動(dòng)校準(zhǔn)功能,減少人工干預(yù)。
四、主要技術(shù)參數(shù)(以NanoDrop One為例)
參數(shù)項(xiàng)目 | 參數(shù)數(shù)值 |
---|---|
波長范圍 | 190–850 nm |
波長精度 | ±1.0 nm |
樣品體積 | 1–2 µL |
光程長度 | 自動(dòng)切換(0.2 mm和1.0 mm) |
吸光度范圍 | 0.02 – 300 Abs(相當(dāng)于濃度范圍更寬) |
吸光度準(zhǔn)確度 | ±3%(at 0.97 Abs) |
樣品檢測時(shí)間 | 每樣品約3–5秒 |
樣品恢復(fù) | 無需比色皿,樣品可回收 |
數(shù)據(jù)存儲與導(dǎo)出 | 支持U盤導(dǎo)出、Wi-Fi傳輸、打印等方式 |
尺寸與重量 | 約20×25×15 cm,重量約3.5 kg |
五、功能與操作特點(diǎn)
無需比色皿檢測:只需1–2 µL樣品直接滴加于檢測平臺,適用于低體積生物樣品;
自動(dòng)檢測并校準(zhǔn)光程:系統(tǒng)可根據(jù)樣品濃度自動(dòng)調(diào)整光程,有效避免飽和吸光;
快速檢測與實(shí)時(shí)分析:3–5秒內(nèi)完成檢測,適用于高通量樣品處理;
內(nèi)置數(shù)據(jù)庫與結(jié)果解讀:儀器軟件支持實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)解釋,包括純度比值(如A260/A280,A260/A230)自動(dòng)計(jì)算;
用戶友好界面:圖形化操作界面、支持觸控或外接鼠標(biāo)鍵盤操作,適配不同使用習(xí)慣;
多語言支持與遠(yuǎn)程導(dǎo)出:便于國際實(shí)驗(yàn)室使用,支持本地或云端數(shù)據(jù)傳輸;
應(yīng)用向?qū)Чδ?/strong>:內(nèi)置不同樣品類型的分析流程,例如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、微生物懸液等。
六、應(yīng)用場景
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn):用于提取后DNA、RNA濃度及純度檢測;
蛋白質(zhì)研究:蛋白濃度定量分析及污染判斷;
臨床檢測實(shí)驗(yàn)室:樣品制備前質(zhì)量控制;
生物制藥過程監(jiān)測:中試與質(zhì)控過程中的樣品檢測;
農(nóng)業(yè)和食品檢測:動(dòng)植物樣品中核酸成分分析;
科研教學(xué)單位:教學(xué)示范與本科/研究生實(shí)驗(yàn)室日常檢測任務(wù)。
七、使用注意事項(xiàng)
樣品需均勻混勻:避免樣品不均影響檢測準(zhǔn)確性;
平臺需及時(shí)清潔:每次檢測后用無菌紙巾或棉簽清理檢測平臺,避免交叉污染;
樣品濃度需在檢測范圍內(nèi):過高濃度需稀釋,防止吸光度超出線性范圍;
環(huán)境干擾控制:應(yīng)放置于干燥、無振動(dòng)的環(huán)境,避免光線干擾;
定期校準(zhǔn)與維護(hù):建議每月至少進(jìn)行一次儀器光程及吸光度校準(zhǔn);
樣品順序標(biāo)記清晰:便于后續(xù)數(shù)據(jù)分析與回溯;
避免樣品氣泡:氣泡會干擾光路,影響檢測精度。
八、維護(hù)與保養(yǎng)
檢測頭定期清潔:用去離子水或70%乙醇清洗檢測區(qū)域;
避免樣品殘留干結(jié):每次使用后立即清理平臺;
避免尖銳物接觸檢測表面:防止刮傷造成光路誤差;
軟件升級與故障排查:定期檢查軟件版本,并記錄系統(tǒng)報(bào)錯(cuò)信息進(jìn)行維護(hù)。
九、小結(jié)
賽默飛微量紫外分光光度計(jì)適用于對樣品量敏感但分析要求嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)場景,其設(shè)計(jì)兼顧便捷性與實(shí)用性,能夠?yàn)楹怂?、蛋白質(zhì)等多種生物樣品的濃度和純度分析提供技術(shù)支撐。通過優(yōu)化樣品檢測流程,用戶可以在短時(shí)間內(nèi)獲取所需數(shù)據(jù),提升實(shí)驗(yàn)效率。