目錄:柏萊源（天津）生物科技有限公司>>生物試劑>>試劑盒kit>> HG-BE001全能核酸酶 ELISA 檢測試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 96 T |
|---|---|---|---|
| 應用領域 | 生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
貨號： HG-BE001
全能核酸酶 ELISA 檢測試劑盒用于檢測各種生物制品的中間品、半成品和成品中核酸酶的殘留含量。
本試劑盒應用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術測定樣品中全能核酸酶（以下簡稱核酸酶）的微量殘留。用捕獲抗體包被 96 孔酶標板，制成固相抗體，隨后加入標準品和檢測樣品，再加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的標記抗體，形成一個固相抗體-核酸酶-標記抗體的三明治結合物，反應結束后洗滌，然后加入底物進行顯色反應，底在HRP的催化下轉化成藍色，并在終止液的作用下轉化成最終的黃色。在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），通過標準曲線計算待測樣品中核酸酶的含量。
96 T
備注：試劑保存溫度為2~8℃，顯色液A和顯色液B應避光保存。
| 組分 | 規(guī)格 | 配制 |
|---|---|---|
| Nucleases Coated Plate ( 包被酶標板 ) | 8×12條 | -20℃ |
| Nucleases Standard ( 標準品 ) | 100μL×1管（0.5μg/mL） | 按建議稀釋方式操作 |
| Anti-Benzonase (酶標抗體) | 15mL×1瓶 | 即用型 |
| Sample Diluent Buffer (樣品稀釋液) | 30mL×1瓶 | 即用型 |
| 20×Wash Buffer (20×洗液） | 30mL×1瓶 | 按建議稀釋方式操作 |
| Color Reagent A (顯色液A) | 8mL×1 瓶 | 即用型 |
| Color Reagent B (顯色液B) | 8mL×1 瓶 | 即用型 |
| 封板膜 | 5張 | 即用型 |
| 說明 | 1份 | / |
未開封的試劑盒， 2-8℃條件下有效期為12個月。
1. 酶標儀、酶標板恒溫振蕩器或恒溫培養(yǎng)箱、洗板機。
2. 高精度移液器及一次性吸頭（0.5-10µL、10-100µL、30-300µL、100-1000µL）。
3. 去離子水、吸水紙、 EP管。
1.1×洗液：取洗液（20×）1份，加19份去離子水配制成工作濃度洗液（1×）。洗液（20×）中如果有結晶形成，應置于室溫或37℃水浴輕輕搖晃，待結晶完i全溶解后再進行稀釋。未用完的洗液（20×）應置于2-8℃儲存。
2. 標準品的配制：用樣品稀釋液將標準品稀釋至5ng/mL，然后用2.5倍倍比稀釋的方法配制標準品。
3. 底物液的配制：使用前i十分鐘將顯色液A、顯色液B等體積混合，避光。確保底物液不被污染，如混合后的底物液已經(jīng)變藍，請勿使用。
詳見樣品前處理試劑盒（貨號為HG-CL100）操作說明書。
2. 標準品的配制：用樣品稀釋液將標準品稀釋至5ng/mL，然后用2.5倍倍比稀釋的方法配制標準品，如下圖：
3. 樣品溫育：設置標準品孔、空白孔和樣本孔，標準品孔按順序加入不同濃度的標準品100µL，空白孔加入樣品稀釋液100µL，樣本孔中加入待測樣本100µL，用封板膜封板，然后置于37℃溫育1h。
4. 洗板：棄去孔中液體，用1×洗液洗板3次（250µL/孔），拍干樣品孔中的殘留液體。（每次加入洗液后，如采用手洗板，加洗液后可靜置1min并輕微震蕩；如采用洗板機洗板，加洗液后可輕微震蕩5s。）
5. 酶標抗體溫育：每孔加入100µL酶標抗體，用封板膜封板，然后置于37℃溫育1h。
6. 洗板：同步驟4。
7. 顯色：將預先配置好的底物液加入酶標板中，混勻（100µL/孔），用封板膜封板， 37℃避光溫育15min。
8. 終止：加入終止液， 100µL/孔。
9. 讀數(shù)：在酶標儀中測定雙波長450/630nm處的OD值，測定應在終止后20min內完成。
以核酸酶標準品的OD值（OD450nm-OD630nm）為因變量Y，以標準品濃度為自變量X做曲線。推薦使用四參數(shù)Logisitic數(shù)學模型擬合方程： Y=((A-D)/(1+(x/C)^B))+D，以樣品OD值（OD450nm-OD630nm）代入公式計算樣品中核酸酶的含量）。
| 標準品濃度(ng/mL) | O D 值 ( 1 ) | O D 值 ( 2 ) | 平均值 |
| 5 | 1.925 | 1.774 | 1.849 |
| 2 | 0.917 | 0.865 | 0.891 |
| 0.8 | 0.447 | 0.441 | 0.444 |
| 0.32 | 0.228 | 0.209 | 0.218 |
| 0.128 | 0.146 | 0.137 | 0.141 |
| 0.0512 | 0.114 | 0.107 | 0.110 |
1. 本試劑盒僅供體外研究使用，不用于臨床診斷。
2. 試劑盒必須在有效期內使用。
3. 試劑盒內所有組分都必須恢復至室溫（18-25℃）后方可使用。
4. 試劑盒各組分使用前充分混勻，板條洗滌后拍干時，注意防止板條脫落。
5. 只有嚴格遵守說明書的操作方法，全部使用本試劑盒配套的試劑才能保證優(yōu)良檢測效果。
6. 注意在不同樣本和步驟間及時更換加樣槽和吸頭，避免交叉污染。
7. 最終的試驗結果與試劑的有效性、操作者的操作方法及試驗環(huán)境密切相關。
8. 本公司只對試劑盒本身負責，不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責，請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量，預留充足的樣本。
| 問題描述 | 可能原因 | 相應對策 |
| 標準曲線梯度差 | 吸液或加液不準 | 檢查移液器及吸頭 |
| 酶標板洗滌不完i全 | 保證洗板次數(shù)及每孔的洗液用量 | |
| 顯色很弱或無色 | 溫育時間太短 | 保證足夠的溫育時間 |
| 實驗溫度不正確 | 使用推薦的溫育溫度 | |
| 試劑體積不夠或漏加 | 檢查吸液及加液過程，保證所有試劑按順序足量添加 | |
| OD值讀數(shù)低 | 酶標儀設置不正確 | 在酶標儀上檢查波長和濾光片裝置 |
| 讀數(shù)前應提前打開酶標儀進行預熱 | ||
| 變異系數(shù)大 | 加液不正確 | 檢查加液情況 |
| 酶標板底部有污染 | 檢查酶標板底部是否有殘留的液體和手印 | |
| 板孔內有異物或氣泡 | 加樣前確認板孔內無異物，加樣后確認無氣泡 | |
| 背景值高 | 酶標板洗滌不完i全 | 按說明書推薦的方法進行洗板 |
| 如果用自動洗板機，請檢查所有的加液口和排廢液口是否有堵塞 | ||
| 如果是手洗板，可適當增加洗板次數(shù) | ||
| 洗液有污染 | 配制新鮮洗液 | |
| 靈敏度低 | 試劑盒保存不當 | 按說明書要求保存相關試劑 |
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柏萊源（天津）生物科技有限公司的優(yōu)勢：
現(xiàn)貨供應：公司庫存充足，可快速發(fā)貨，減少用戶等待時間。
效期保障：嚴格把控產(chǎn)品質量，確保試劑效期新鮮，保障實驗結果的可靠性。
專業(yè)技術支持：提供詳細的實驗方案和技術指導，幫助用戶優(yōu)化實驗條件，提高實驗成功率。
定制化服務：根據(jù)用戶需求，提供個性化的產(chǎn)品和服務解決方案。
售后保障：完善的售后服務體系，及時解決用戶在使用過程中遇到的問題。
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