細(xì)胞種植到玻片上是一種常見(jiàn)的細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),通常用于顯微鏡觀(guān)察、免疫熒光染色、細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)等。以下是基本的步驟:
準(zhǔn)備材料:
無(wú)菌玻片:可以是普通顯微鏡載玻片或預(yù)涂有特定物質(zhì)(如多聚賴(lài)氨酸、纖連蛋白等)的玻片,以促進(jìn)細(xì)胞附著。
無(wú)菌磷酸鹽緩沖液(PBS):用于清洗和維持細(xì)胞。
細(xì)胞培養(yǎng)基:包含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。
血清:通常添加到培養(yǎng)基中,提供生長(zhǎng)因子和其他必需成分。
胰蛋白酶或類(lèi)似的細(xì)胞分離液:用于從培養(yǎng)容器中分離細(xì)胞。
無(wú)菌蒸餾水或70%乙醇:用于玻片的消毒。
消毒玻片:
細(xì)胞準(zhǔn)備:
從培養(yǎng)瓶中取出細(xì)胞,用胰蛋白酶處理使細(xì)胞從培養(yǎng)表面上脫落。
將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管中,離心以收集細(xì)胞。
用新的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度至適合種植的密度。
種植細(xì)胞:
培養(yǎng)和觀(guān)察:
后續(xù)處理:
注意:所有步驟都應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行,以避免細(xì)胞污染。此外,具體的細(xì)胞類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)?zāi)康目赡苄枰囟ǖ恼{(diào)整和優(yōu)化。